常见的细胞因子受体检测的方法介绍

（一）活细胞系吸收试验

原理
将过量的待测细胞与*细胞因子共孵育，若细胞膜表面存在相应的细胞因子受体即可结合细胞因子，通过测定前、后细胞因子生物活性的对比情况可推测待测细胞表面细胞因子受体是否存在。
方法
1．过量的待测细胞、适量细胞因子准备。
2．共孵育，时间根据待测细胞和细胞因子选择。可设2h,4h,6h,8h和更长时间。
3．离心（1500r/min, 5分钟）收集上清液。
4．测定孵育前后的细胞因子活性。方法同细胞因子测定。
注意事项
此法简便，适用于定性，但不适用于定量检测。
（二）核素标记重组细胞因子的放射受体分析
该方法是确定细胞因子受体分布及其特性的主要方法，可测定细胞受体的数量及亲和力。通常标记的方法有以下两种：
1．重组细胞系因子和核素体体外共孵育。
2．利用cDNA转录获得足够量的细胞因子mRNA，注入非洲爪蟾卵母细胞内，在体外翻译的底物中加入核素标记的氨基酸（如35S-Met或3 H-Leu等）。通过生物合成内标记产生的重组细胞因子的功能不受影响，因此适用于某些稳定性较差的细胞因子的检测。
（三）可溶性细胞因子受体的检测
细胞因子受体除存在于细胞膜外，尚有部分细胞因子受体可分泌进入体液，称为可溶性细胞因子受体（solublecytokinereceptor)，如sIL-2R,sIL-4R和slFN-yR。这类受体多采用免疫学方法检测故在此不作介绍。

（四）抗受体McAb法
利用细胞因子的McAb既可通过封闭受体抑制相应细胞因子的生物学活性进行受体检测，也可用标记的McAb直接作免疫放射受体分析或免疫沉淀。
（五）重组细胞因子RIA法
利用化学交联剂将标记的重组细胞因子与膜受体交联，细胞裂解物经PAGE后进行放射自显影分析，通过带型分析可确定受体的分子量及亚单位。
（六）受体cDNA分析
分子克隆是在基因水平上研究细胞系因子受体的*途径，通过核苷酸序列推导的氨基酸顺序进行结构功能区分析，是深入探讨受体作用机制的基础。此外还可利用基因工程技术重组受体子。目前已有10多种细胞因子受体的基因被克隆出来，包括IL-1R, IL-2Ra及IL-3R,IL-4R,IL-6R,IL-7R，INF/R，MPOR,M-CSFR等。