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原代细胞增殖生长数值的步骤

更新时间:2018-04-17点击次数:129

测定原代细胞增长数值常用zui简便的方法。

一般过程为

1. 接种21 孔/24 孔板细胞(如用培养瓶时则21 瓶)。

2. 分7 组,每组3 孔(或瓶),培养一周(7 天),期间逐日检测一组,计数。

3. 把7 天中的细胞数值绘成图,即为细胞生长曲线。
实验材料    
细胞
试剂、试剂盒    
胰蛋白酶
仪器、耗材    
吸管
实验步骤    1. 悬液制备

取待测生长状态良好细胞,增长至接近汇合时,向培养瓶内加1 ml升0.25 %胰蛋白酶液,37 ℃温箱中消化,至细胞接近脱离瓶壁前吸出消化液、加新的培养液、轻吹打制备成细悬液、计数;

2. 接种

向每孔中接种等量细胞,置温箱中培养;把培养瓶中营养液倒入试管中并记录下毫升量;

3. 计数检测

从次日起,即开始检测*组每个孔(或瓶)中的细胞总数,用计算盘或用细胞自动计数器计数,取3 个孔的均值,如此至第7 组结束;

4. 绘图

用座标图纸绘成生长曲线。
收起
注意事项    
1. 计数法简便易行,但不够,约有20 %~30 %的误差。为提高准确性,每孔也应计算2~3 次,则总和每组计算总次数达6 次~12 次,均值可能更为。

2. 原代细胞数量增加1 倍的时间称倍增时间,亦可从细胞生长曲线中测知。
Neotame Related Compound A    15mg    纽甜相关物质A标准品    
Nevirapine Anhydrous     100mg    无水奈韦拉平标准品    129618-40-2 
Nevirapine Hemihydrate     100mg    半水奈韦拉平标准品    129618-40-2 
N-Glycolylneuraminic Acid     200mg    N-羟乙酰神经氨酸标准品    1113-83-3 
Niacin    200mg    烟酸标准品    59-67-6
Niacinamide (Vitamin B3)    500mg    烟酰胺标准品    98-92-0 
Nicotine Bitartrate Dihydrate     500mg    二水合重酒石酸尼古丁标准品    6019/6/3
Nifedipine     125mg    硝苯地平标准品    21829-25-4 
Nimodipine     125mg    尼莫地平标准品    66085-59-4 
Nitazoxanide    200mg    硝唑尼特标准品    55981-09-4 
原代细胞

 

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