避免污染的原代细胞培养方法

 培养原代细胞常规方法需用二氧化碳温箱，且为保持箱内二氧化碳气5%～10%的浓度，需持续输入二氧化碳气体。为此，箱内的培养瓶盖不能拧紧以便二氧化碳气体自由进出。

    *步，配制1L培养液。培养基中含有酚红指示剂，偏碱时液体为深红或紫色，偏酸时则呈黄色。取配1L培养液的粉剂培养基，加入750ml三蒸水或去离子水，摇匀(一般培养液呈橘红色)；再加入碳酸氢钠1～1．1g，至*溶解(呈深红色)；zui后再加三蒸水或去离子水至1L止。

    第二步，插吸管于配好的培养液内，通入二氧化碳气体。随着二氧化碳气的融人，液体逐渐变成黄色。用一次性0．22 m孔径的滤膜于正压情况下将该液体过滤除菌。在此过程中，由于部分二氧化碳气体溢出，液体渐成橘黄色。此时迅速将其分装到4个250ml的瓶内，一定塞严或拧紧瓶。在无菌情况下取样本数毫升，37。c无菌培养72h，确定该批培养液无污染后方可使用。常使用的培养液存放于4℃冰箱内，其它暂时不用的可放入一20。c冰箱内保存。

    第三步，根据不同细胞系的需求添加不同量血清和抗生素。将配好的培养液吸入小培养瓶内，再将适量细胞吸入，塞严或拧紧瓶盖，置37。c普通隔水式恒温箱内即可。操作过程中因有少量二氧化碳气体溢出，液体呈橘红色，酸碱度(pH) 约为7．0～7．2。如果原代细胞较少或者生长较慢，液体的pH值似宜偏酸些为好。

    我们的产品原料为进口原装：无菌包装，不需要做任何除菌的处理，直接使用。

250 用于副溶血性弧菌的增菌培养 副溶血性弧菌增菌液

250 Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养（GB标准） 氯化钠结晶紫增菌液    

250 Halophilic Bacteria Selective Agar 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养（GB标准） 嗜盐菌选择性琼脂  

250 Sodium Chloride Sucrose Agar 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养（GB标准） 氯化钠蔗糖琼脂    

250 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养 副溶血性弧菌琼脂

250 NaCl Triple Sugar Iron Agar 用于副溶血性弧菌的生化反应筛选（SN标准） 氯化钠三糖铁     

250 Sodium Chloride Blood Agar Base 用于副溶血性弧菌的溶血试验 氯化钠血琼脂基础   

250克 Wagstsuma Agar Base 用于副溶血性弧菌的溶血试验 我妻氏血琼脂培养基基础

250 60%/L NaCl Peptone Water 用于副溶血性弧菌的前增菌培养 60%/L氯化钠蛋白胨肉汤    
原代细胞