细胞株冻存技术

细胞株实验室低温保存设备包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。

检验冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常规冰箱放置温度计；2、超低温冰箱放置加热器、大量样品或反复开门
很多化合物都可以作为冻存保护剂，它们既可以单独使用也可以联合使用，例如糖、血清和去污剂。虽然冻存没有准则，但是大家普遍认为二甲基亚砜（DMSO）和甘油是保护活细胞和组织使用zui广泛且zui有效的冻存保护剂。其他冻存保护剂可根据情况使用，可单独使用也可联合使用，包括：聚乙烯乙二醇（polyethylene glycol），丙烯乙二醇（propylene  glycol），甘油（glycerine），聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrolidone），山梨醇（sorbitol），右旋糖苷（dextran），海藻糖（trehalose）。

冻存组织和整个器官的需求，促进了冻存方法的发展，新方法也提高了冻存细胞和有机体的复苏。这些方法包括改变冻存保护剂的浓度和加入添加剂，避免冻存过程引发的细胞调亡或 程序性死亡。多年来人们一直认为，是冻存过程中产生的细胞内物理变化或损坏，造成冻存后细胞的死亡。而zui近有研究发现，一些更为精细的胞内活动可能导致了细胞死亡，而这些活动可在一定程度上受控于适当的冻存添加剂。

冻存过程中，冻存保护剂有多种功能。例如，DMSO 可以降低冰点，促进细胞在胞内冰晶形成之前脱水更加*。普遍认为，当冻存保护剂可有效穿透细胞，延迟胞内冰晶形成，降低溶液效应时，冻存保护的效果*。另外，需要根据冻存的细胞类型来选择冻存保护剂。对绝大多数细胞来说，甘油是更好的选择，因为它的毒性比DMSO 小。但是，DMSO 具有更好的渗透性， 通常作为较大型较复杂的细胞冻存，如原生生物。在添加到细胞株悬液之前，冻存保护剂应该用新鲜培养基稀释到适宜浓度，这能zui小化潜在的化学反应损害，并确保细胞能均一接触到保护剂，减少毒害效应。DMSO 和甘油通常使用的浓度范围为 5-10%（v/ v）。除了用于植物细胞，二者一般不联合使用。

 锌指蛋白474IgG 大鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )

 锌指脂蛋白-1aIgG 大鼠黑色素(MC Ab)

 锌指脂蛋白-1bIgG 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα) 

 锌指脂蛋白-1cIgG 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)

 锌指脂蛋白217IgG 大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)

 锌指转录因子SlugIgG 大鼠核因子κB(NF-κB)

 新的饱食分子蛋白IgG 大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)

 新朊蛋白/朊蛋白相关蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白IgG 大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)

 新型血管活性因子UCN（人）IgG 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)
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