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锦葵色素-O-葡萄糖苷含量测试盒​操作步骤

更新时间:2022-01-18点击次数:237

锦葵色素-O-葡萄糖苷含量测试盒操作步骤(仅供参考):  

1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。

2.准备样品:  

a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。  

b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。  

c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。

d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  

e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。

f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  

3、CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。

4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

ADAR1 (C-terminus)双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体(C端)

AF10髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体

ADCY1腺苷酸环化酶1抗体

APC腺瘤样息肉抗体

AGPAT1溶血磷脂酰基转移酶抗体

ANKS3锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体

phospho-ALK (Tyr1586)磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体

AMSH信号转导衔接结合蛋白抗体

ASB3锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族3抗体

Aurora C有丝分裂激酶B抗体

Phospho-Ack1 (Tyr284)磷酸化Ack1抗体

Phospho-Ack1 (Tyr326)磷酸化Ack1抗体

Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412)磷酸化β抑制蛋白1抗体

Phospho-Aurora A (Thr288)磷酸化有丝分裂激酶A抗体

phospho-APS(Ser598)磷酸化APS抗体

Aurora A有丝分裂激酶A抗体

AIM2干扰素诱导蛋白AIM2抗体

Aquaporine 2水通道蛋白-2抗体

ABI2肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体

ARL11ADP核糖基化因子样11抗体


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