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大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)elisa试剂盒操作步骤

更新时间:2022-08-16点击次数:229

大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)elisa试剂盒操作步骤


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

角质细胞生长因子调节蛋白2抗体现货供应英文名称:KRG2

钾离子通道蛋白G蛋白4抗体现货供应英文名称:KCNG4

钾通道多聚体结构域KCTD18抗体现货供应英文名称:KCTD18

胞质接头蛋白Keap1现货供应英文名称:KEAP1

舞蹈症相关蛋白KALRN抗体现货供应英文名称:KALRN

细胞内流钾通道蛋白Kir4.1抗体现货供应英文名称:Kir4.1

肾病样蛋白3抗体现货供应英文名称:KIRREL3

KLF样转录因子7抗体现货供应英文名称:KLF7

Kelch样蛋白8抗体现货供应英文名称:KLHL8

钾离子通道蛋白家族KCNQ2抗体现货供应英文名称:KCNQ2

钾离子通道多聚体结构域蛋白7抗体现货供应英文名称:KCTD7

钾通道蛋白1抗体现货供应英文名称:Kv1.1

电压门控钾通道蛋白1抗体现货供应英文名称:KCNAB1

微管驱动蛋白家族成员1A抗体现货供应英文名称:KIF1A

钾离子通道蛋白家族成员1抗体现货供应英文名称:KCNE1

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