人抗内皮细胞抗体（AECA）酶联免疫分析试剂盒操作步骤

人抗内皮细胞抗体（AECA）酶联免疫分析试剂盒操作步骤：

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

促肾上腺皮质激素受体ACTHR 0.1ml

褐黑素相关蛋白ART抗体AGRP 0.2ml

肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白抗体Adrenodoxin 0.2ml

Allgrove综合征相关蛋白抗体Adracalin 0.2ml

腺相关病毒5 VP1抗体AAV5 capsid protein VP1 0.1ml

脂肪醛脱氢酶抗体ALDH3A2 0.2ml

抗利尿激素1A抗体AVPR1A 0.2ml

抗利尿激素受体1B抗体AVPR1B 0.2ml

二磷酸腺苷核糖基化因子鸟嘌呤核苷酸交换因子2抗体ARFGEF2 0.2ml

α增强子结合蛋白1抗体ATBF1 0.2ml

脊髓小脑共济失调10抗体ATXN10 0.2ml

蛋白激酶A锚定蛋白7抗体AKAP7 0.2ml

腺苷三磷酸结合盒转运体12抗体ABCA12 0.2ml

腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体ABCB9 0.2ml

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体ABCD4 0.2ml

肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体ABLIM3 0.2ml

高尔基复合体相关蛋白1抗体ACBD3 0.2ml