如何选择适合的免疫组化对照

免疫组化对照的选择其实是个技术直接看关键点：

一、对照类型怎么选

‌阳性对照‌

‌选材‌：用已知表达目标抗原的组织（如HER2检测用乳腺癌组织）

‌关键‌：与实验组同步处理，避免固定时间差异

‌阴性对照‌

‌两种方案‌：

省略一抗，仅用二抗+显色剂

用同种属无关抗体替代一抗

‌注意‌：若显色，需排查抗体交叉反应

‌空白对照‌

‌操作‌：仅用二抗+显色剂

‌意义‌：排除二抗非特异性结合

‌替代对照‌

‌操作‌：用同种属无关抗体替代一抗

‌示例‌：一抗为mouse anti rat CD11b，同型对照为mouse IgG2a

二、操作要点

‌阳性对照‌：需用独立已知阳性样本验证体系有效性

‌阴性对照‌：需用不表达目标抗原的样本

‌空白对照‌：需省略一抗，仅用二抗和显色剂

‌同型对照‌：需严格匹配一抗的种属、Ig亚型、标记物及浓度等参数

三、结果判读

‌阳性对照‌：若未显色，需排查抗体失效或操作失误

‌阴性对照‌：若显色，需排查抗体交叉反应或封闭不充分

‌空白对照‌：若显色，需排查二抗非特异性结合

‌总结‌：对照设置需严格匹配抗体特性、染色系统及背景干扰，通过多维度对照确保结果真实性。