细胞系的利用效率如何提高？

【目的】细胞系为提高 L-苹果酸产量及木糖利用率，以寄生曲霉(Aspergillus parasiticus CICC40365)为菌种，木糖为碳源，对其发酵工艺及木糖代谢途径进行初步研究。

【方法】采用单因素试验和响应曲面法(Box-Behnken 设计)对培养基和发酵条件进行优化。

【结果】获得*培养基配方为：木糖 100.0 g/L、硫酸铵 2.0 g/L、酵母浸粉 3.0 g/L、硫酸镁 0.20 g/L、硫酸锰 0.15 g/L、硫酸亚铁 0.08 g/L、碳酸钙 80.00 g/L，L-苹果酸的产量为 53.58 g/L，较优化前提高 40.5%。发酵条件较好组合为：接种量为 8% (体积比)、摇瓶装液量 60 mL/250 mL、发酵温度 32 °C、摇床转速 170 r/min、发酵周期 8 d，L-苹果酸的产量为 55.47 g/L。Mg2+、Mn2+对木糖代谢中相关酶的影响研究结果表明，木酮糖激酶在该菌株代谢木糖过程中起着重要作用。

【结论】寄生曲霉 CICC40365 能够较好地利用木糖发酵产 L-苹果酸，其产量及木糖的利用效率均得到提高。

L-苹果酸(L-malic acid，简称 LMA)是生物体内三羧酸循环的成员之一，它是一种重要的有机酸，被广泛应用于食品、化妆品、医药等领域。 L-苹果酸的主要方法有直接提取法、转换法、发酵法。目前发酵法 L-苹果酸的研究相对较少，发酵法主要分为一步法和两步法。一步发酵法是采用一种微生物直接利用糖质原料进行发酵产 L-苹果酸；两步发酵法是两种不同功能的微生物，将糖质原料先转化为延胡索酸，再转化为 L-苹果酸。后者对发酵条件要求很严格，并且发酵周期长，产酸率较低，副产物也较多，不适合工业化；而一步发酵法可以避免上述缺点，且产物安全性高，备受消费者青睐。

对于直接利用糖质原料一步发酵法产 L-苹果酸的菌种多为黄曲霉 (Aspergillus flavus)和裂褶菌属，以色列 Battat 等报道利用黄曲霉 ATCC13697 发酵产苹果酸，产酸达 113 g/L，强度为 0.59 g/(L·h)；胡纯铿报道了黄曲霉 H-98 发酵产 L-苹果酸，zui高产酸超过 50 g/L。钱秀萍等报道了裂褶菌利用葡萄糖、果糖产 L-苹果酸的产量分别为 10.48 g/L 和 6.28 g/L。虽然细胞系利用黄曲霉发酵的产酸量很高，但是发酵中可能会产生黄曲霉素，存在安全隐患，而该研究所采用的寄生曲霉，未见有文献报道利用其发酵产 L-苹果酸，且安全性有保障。
HPLC≥98%    Cochinchinenin C    剑叶龙血素C    20mg/支
HPLC≥98%    demethoxyaschantin    辛夷脂素    20mg/支
HPLC≥98%    Linderane    乌药醚内脂    20mg/支
HPLC≥98%    Fisetin    漆黄素(非瑟酮/紫铆素)    20mg/支
HPLC≥98%    Piefeltarraenin ⅠA    苦玄参苷ⅠA    20mg/支
HPLC≥98%    Piefeltarraenin ⅠB    苦玄参苷ⅠB    20mg/支
HPLC≥98%    barbaloin    芦荟苷    20mg/支
HPLC≥98%    Atractylenolide I    白术内酯Ⅰ    20mg/支
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