细胞系自动化筛选技术

zui常用的细胞系方法是检测96孔细胞培养板中蛋白的浓度；另外一个方法是让细胞在软琼脂上生长形成集落，然后利用原位免疫沉淀技术获得高产细胞。近年来，发展起来的高通量自动化筛选技术也被受关注。
   为实现克隆的高表达，在有些情况下外源基因扩增，比如以CHO用作宿主细胞；有些情况则不需要，比如杂交瘤细胞。为了实现外源基因的扩增，将细胞在高浓度的扩增标记（比如dhfr）抑制剂的压力下生长。细胞存活需要扩增标记。高浓度的抑制剂能够杀死除拥有多个扩增标记基因以外的绝大多数细胞。在标记基因扩增的过程中，与它相邻的基因也随之发生扩增。基因拷贝数的增加导致转录和翻译水平的提高。在这个过程中，某些高产细胞株重组IgG重链的转录水平成为细胞内zui高。另一方面，过高的蛋白表达可能会超过细胞内蛋白折叠的限度，内质网中发生未折叠蛋白效应导致细胞凋亡。因此没有建立起与高表达相匹配的其它结构的细胞可能不能存活。
     基因扩增后的细胞既含有多个拷贝的外源基因，能高水平的表达目的基因和抗性基因，还具备了强大的蛋白分泌能力。除此之外，高产细胞株还应具备高密度培养和能维持较长平台期的能力。
    基因扩增后的细胞可以视为一个细胞“Pool”，其中含有众多不同遗传背景的细胞，或是基因插入位点的不同，或是扩增程度的不同等等。因此基因扩增后下一步是细胞的单克隆化。单克隆化是利用流式细胞仪或有限稀释法或其他自动化方式(0.2个细胞/孔)将细胞接种到多孔板中。可以认为从某一特定孔里长出的细胞都是由早期的一个细胞分裂而来，他们在遗传上是同源的。
     单克隆化后需要对获得的细胞系进行初步的评价。主要包括生长特性，产品质量的评价。有些情况下需要将细胞驯化到更接近模式的条件下，进行培养。
3x1.5ml    Methyl Alcohol     67-56-1     甲醇标准品
4.5oz            氟化牙粉：氟化钠/二氧化硅标准品
4.6oz            氟化牙粉：单氟磷酸钠-碳酸钙标准品
4.6oz            氟化牙粉：单氟磷酸钠/磷酸氢钙标准品
400mg    Zidovudine     30516-87-1     齐多夫定标准品
400mg    Trehalose     6138-23-4     海藻糖标准品
400mg    Tilmicosin     108050-54-0     替米考星标准品
400mg    Sucralose     56038-13-2     三氯蔗糖标准品
400mg    Sodium Starch Glycolate Type B    9063-38-1     羧甲基淀粉钠标准品（B型）
400mg    Sodium Starch Glycolate Type A    9063-38-1     羧甲基淀粉钠标准品（A型）
400mg    Quinapril Hydrochloride     82586-55-8     盐酸喹那普利标准品
400mg    Octisalate (Octyl Salicylate)    118-60-5     水杨酸乙基己酯标准品
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