相较于一些复杂的分析方法,
分光光度检测试剂盒的使用相对简单,易于操作。只要按照说明书配制好试剂、设置好参数,就可以较快地完成样品的测试,大大提高了工作效率,特别适合批量样品的分析。分光光度检测试剂盒比较便宜且容易获得,这使得该方法在大规模的常规检测中具有明显的经济优势,可广泛应用于化工、冶金、地质、医学、食品、制药等多个部门以及环境监测系统。
分光光度检测试剂盒原理:
1.选择吸收:许多物质的溶液具有颜色,这是由于溶液中的物质对光的选择性吸收造成的。不同的物质因分子结构差异,对不同波长光的吸收能力各异,从而拥有特有的吸收光谱。即使是同一种物质,含量不同时对光的吸收程度也会有所不同。
2.定量依据:基于朗伯-比尔定律,当一束平行单色光垂直照射通过均匀、非散射体系的样品溶液时,若吸光质点之间无相互作用,且入射光与物质间仅发生光吸收过程而无荧光和光化学现象,那么溶液对该单色光的吸收程度与溶液的浓度及光程长度成正比。仪器通过测定特定波长下样品对光的吸光度,再依据该定律计算出样品中目标物质的含量。
分光光度检测试剂盒的测定步骤:
1.仪器准备与预热:打开分光光度计的电源开关,让仪器预热一段时间,通常建议预热30分钟以上,以确保仪器稳定性达到良好状态。根据实验要求调节合适的波长,比如某些情况下可能需要调节到490nm等特定波长,之后用蒸馏水进行调零操作,使仪器的读数基准归零。
2.样本处理与反应体系构建:按照试剂盒说明书的要求对样本进行处理。例如,有的实验需要吸取一定量的上清液,然后依次加入相应的试剂,像先加试剂一和浓硫酸等,并充分混匀。之后可能需要将混合后的溶液置于特定温度下进行水浴加热一定时间,如90°C水浴20min,再流水冷却。
3.测量吸光值:将处理好的反应液放入比色皿中,迅速将其放入分光光度计的光路中进行测量。有些实验可能在特定时间节点有多次测量要求,如先测定初始时刻的吸光值A1.然后在经过一定时间的反应后再次测定吸光值。
4.数据记录与分析:准确记录每次测量得到的吸光度数值,并根据标准曲线或相关公式计算出样本中待测物质的含量或浓度等参数。如果使用了标准品,也需要按照说明书对其进行同样的操作和测量,以便绘制标准曲线用于后续样本的定量分析。