培养肿瘤细胞的冻存

肿瘤细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
1． 冻存细胞 
（1）选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液。 
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10 7 ／ml左右密度，离心，去上清。 
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记。 
（6）冻存：在特殊的 仪器 或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。 
操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。 细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
1． 冻存细胞 
（1）选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液。 
（2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10 7 ／ml左右密度，离心，去上清。 
（3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 
（4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 
（5）旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记。 
（6）冻存：在特殊的 仪器 或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。 
肿瘤细胞操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。
Daidzin    大豆苷    规格:    20mg/支    进口/国产    大豆甙
Daidzein    大豆苷元    规格:    20mg/支    进口/国产    大豆甙元;黄豆苷元
Genistein    染料木素    规格:    20mg/支    进口/国产    染料木黄酮;金雀异黄酮
Genistin    染料木苷    规格:    20mg/支    进口/国产    5,7-三羟异黄酮-7-糖苷
Imperatorin    欧前胡素    规格:    20mg/支    进口/国产    
Isoimperatorin    异欧前胡素    规格:    20mg/支    进口/国产    
Polygalacic acid    远志酸    规格:    20mg/支    进口/国产  肿瘤细胞