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肿瘤细胞因子的溶解方法

更新时间:2017-08-16点击次数:218

肿瘤细胞因子中不含载体蛋白或其他添加剂,并且通常以zui少量的盐来进行冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后,务必在开盖前先离心,使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。 
   1.离心:高速离心20-30秒,或低速离心5分钟。 
   2.溶解:细胞因子用去离子水或其它缓冲液溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的产品,需用10uL-100uL的去离子水或缓冲液溶解)。溶解时不可振荡,避免因化学键的断裂造成蛋白失活,可加入适当的溶剂轻摇并静置一段时间,待细胞因子*溶解后使用。溶剂的选择: 
(1)要求用去离子水溶解的产品,务必不可用盐溶液,避免过高的盐浓度造成蛋白不可逆的析出; 
(2)要求用盐溶液溶解的产品,请依照细胞因子说明书上的浓度,同样也是为了避免过高的盐浓度。 
   3.分装和贮存:细胞因子蛋白溶解后可根据自己的实验需要进一步稀释成工作液,稀释可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其中含有5-10%的FCS (小牛或胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)来稳定蛋白。工作液在4℃可保存1周,如需长期保存,肿瘤细胞则需分装冻存于-20℃ (注意:不可冻存于-80℃)。分装时每管中工作液的体积是一次实验的用量,以实现每次实验用完一只工作液,避免反复冻融引起蛋白活性的降低。
 VLA     人迟现抗原     规格:    48T/96T
 MPF     人成熟促进因子     规格:    48T/96T
 OGP     人成骨生长肽     规格:    48T/96T
 SOD     人超氧化物歧化酶     规格:    48T/96T
 hs-CRP     人超敏C反应蛋白     规格:    48T/96T
 Sag     人超抗原     规格:    48T/96T
 iFABP     人肠脂肪酸结合蛋白     规格:    48T/96T
肿瘤细胞

 

 

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