中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)重组蛋白公司正在出售的产品：巴布亚旋毛虫PCR检测试剂盒Trichinella papuae PCR巴布亚旋毛虫探针法荧光定量PCR试剂盒Trichinella papuae巴尔通体通用PCR检测试剂盒Bartonella spp.PCR巴尔通体通用探针法荧光定量PCR试剂盒Bartonella spp.巴马森林病毒PCR检测试剂盒Barmah Forest Virus

公司产品仅供科研实验产品属性：

产品名称：中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)重组蛋白   

物种：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

英文名称：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)

ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

酶与激酶

感染免疫

相关产品：
Recombinant Human PDIA3宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombinant Human CHCHD4宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombinant Human Angiogenin宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombinant Human ASUN宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

标签选择：

亲和标签：蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用：一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易；另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类：一类是短肽类标签；一类是长肽以融合蛋白（fused partner）形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。

不同的系统步骤稍微有些不同的，大致步骤如下：

真核表达系统的重组蛋白表达步骤：

a.      选择表达载体和宿主细胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表达载体的构建

c.      无内毒素的质粒抽提

d.      细胞瞬时转染

e.      表达小试，条件优化

f.       表达分析和鉴定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表达

h.      亲和纯化

i.        检测和鉴定

原核表达系统的重组蛋白表达步骤：

a.      选择表达载体

b.      密码子优化

c.      基因合成/亚克隆

d.      转化表达菌株

e.      蛋白表达小试分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白亲和纯化

g.      如果蛋白不可溶，则需要变复性来制备可溶蛋白。

h.      鉴定，包括SDS-PAGE和WB鉴定

GZMH蛋白；表达蛋白的分析、纯化、检测

　　诱导表达成功后，表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当，按一般的实验步骤做没太大的问题。

操作步骤 ：

根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用（PMSF 现用现加）。

1、样品前处理：

a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。

c)对于组织样品： 把切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

2、后处理：

将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特点：

标记：标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性，将与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。

酶标记：酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成，其应用范围非常广泛，结果即时可见、敏感性高。

荧光标记：荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一，产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光， 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。

Acrosin产品名称: 顶体前体蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

phospho-SHC1 (Tyr427)产品名称: SH2结构域转化蛋白1抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat

Retiid X receptor alpha产品名称: 核受体RXRα抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse

VEGFA产品名称: 内皮生长因子抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit

应用类型: Other英文名称: MAP4K4英文别名: Hepatocyte progenitor kinase like/germinal center kinase like kinase; HGK; HPK/GCK like kinase; HPK/GCK like kinase HGK; KIAA0687; MAPK/ERK kinase kinase kinase 4; MEK kinase kinase 4; MEKKK 4; MEKKK4; Mitogen activated protein kinase kinase kinase kinase 4; Nck interacting kinase; NIK; M4K4_HUMAN.

BNC1产品名称: 碱性核蛋白1/锌指蛋白basonuclin抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat

PDGF-D/SCDGFB产品名称: 小板源性生长因子D/脊髓源性生长因子B抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

UBE2Q1产品名称: 泛su蛋白连接meiQ1抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

HP1 gamma产品名称: 异染色质蛋白1-γ/HP-1γ单克隆抗体产品别名: HP-1-γ; HP 1γ; HP-1γ; HP-1 γ; HP1γ; HP1 γ;

TREM2产品名称: 髓系细胞触发受体2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)重组蛋白人纤溶mei/纤维蛋白溶mei(PL/Fbn)ELISA试剂盒PL/Fbn纤溶mei/纤维蛋白溶meielisamei联免疫试剂盒Human plasmin/fibrinolysin,PL/Fbn ELISA Kit

人细小病毒B19(B19V)抗体(IgM)ELISA试剂盒B19V细小病毒B19elisa检测试剂盒Human parvovirus B19(PB19V)antibody IgM ELISA kit

人细胞周期suA2(Cyclin-A2)ELISA试剂盒Cyclin-A2细胞周期suA2ELISA试剂盒Human Cyclin-A2 ELISA Kit

人细胞周期蛋白依赖性激mei2(CDK2)ELISA试剂盒CDK2细胞周期蛋白依赖性激mei2elisamei联免疫试剂盒Human Cyclin-dependent kinase 2,CDK2 ELISA kit

人细胞周期蛋白A1(CCNA1)ELISA试剂盒CCNA1细胞周期蛋白A1elisa检测试剂盒Human Cyclin-A1,CCNA1 ELISA kit