SV-40Z转化肺成纤维细胞;WI38/VA13公司正在销售的产品：二氢二脱氢酶1/2抗体Anti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC 荧光素标记上皮型钙粘附分子/血管内皮钙粘蛋白抗体IgG
形态发生紊乱关联活因子2抗体Anti-CD146(MCAN)/FITC 荧光素标记抗黑色素瘤粘付分子CD146抗体IgG
质分裂付出蛋白2抗体Anti-CD158a/KIR2DL1/F

产品名称：SV-40Z转化肺成纤维细胞;WI38/VA13

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9972

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻"，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Tyk2/Non receptor tyrosine protein kinase 2/FITC 荧光素标记非受体酪蛋白激酶2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14) 嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

细胞质膜微囊蛋白-1抗体  Cav-1 0.1ml

SEMA6C 英文名称： 轴突导向因子SEMA6C抗体 0.2ml

ECG2 英文名称： 食道癌相关基因抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HP1(Tyr43) 异染色质蛋白1磷酸化抗体(果蝇) 规格 1ml

CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14) 嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

mouse Caspase-2 小鼠Caspase-2Multi-class antibodies规格： 48T

 FLIP S/L 凋亡调节基因之一抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗兔IgG 规格 0.1ml

Gal(Human Alpha-galactoyl) ELISA Kit 人α半乳糖基抗体 96T

Syntrophin-2 英文名称： 互养蛋白2抗体 0.1ml

CCDC83 英文名称： 卷曲螺旋结构域蛋白83抗体 0.1ml

 FLIP S/L 凋亡调节基因之一抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rabbit  mouse Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗小鼠k链 0.1ml

Frizzled 2 英文名称： Wnt信号受体FZD2蛋白抗体 0.1ml

富半胱肝素结合蛋白61  Cyr61 0.2ml

 PAP2c /FITC 荧光素标记磷脂酸磷酸酶2C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2(Ser664) 磷酸化结节性硬化蛋白抗体 规格 0.1ml

Goat  bov IgM/FITC 荧光素标记羊抗IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml
SV-40Z转化肺成纤维细胞;WI38/VA13冻切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠干因子/肥大生长因子（SCF/MGF）ELISA试剂盒,

石蜡切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠儿茶酚（CA）ELISA试剂盒,

细胞RyR受体蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次大鼠球蛋白G（IgG）ELISA试剂盒,

细胞RyR受体蛋白表达荧光定量检测试剂盒10/50 次兔子转化生长因子β1（TGF-β1）ELISA试剂盒,

RyR受体蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次铁蛋白（FE）ELISA试剂盒--动物，人

RyR受体蛋白共沉淀分析试剂盒5次复  每支添加于 100ml HB4155

RyR受体蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25次Half –Fraser 培养基用于李氏菌的增菌培养（MERCK标准）

?细胞IP3R受体蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次无 盐胰胨水

载玻片细胞IP3R受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次L-半胱盐酸盐一水物

冻切片组织IP3R受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次FMOC-D-缬

石蜡切片组织IP3R受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次H33342荧光染料

载玻片细胞IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人P糖蛋白/渗透性糖蛋白（P-gp）ELISA试剂盒,P-gp ELISA kit

冻切片组织IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次人红生成素（EPO）ELISA试剂盒, EPO ELISA

石蜡切片组织IP3R受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次小鼠胰岛素样生长因子2（IGF-2）ELISA试剂盒,

细胞IP3R受体蛋白表达比色法定量检测试剂盒10/50 次人血浆α颗粒膜蛋白（GMP-140）ELISA试剂盒,

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。