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ARTICLES细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:肺动脉成纤维细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X9979
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
Beta-Actin/HRP 辣根过氧化物酶标记β-肌动蛋白(抗体)Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Cav-1/ETM1 peptide 细胞质膜微囊蛋白-1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
新的抑癌基因Brg1抗体 Brg1 0.1ml
mSin3A 英文名称: 同源转录调节蛋白Sin3A抗体 0.2ml
EPOR 英文名称: 红细胞生成素受体抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-IFNAR1(Ser535+Ser539) 磷酸化干扰素α受体抗体 规格 0.1ml
Cav-1/ETM1 peptide 细胞质膜微囊蛋白-1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
兔细胞因子试剂盒 兔细胞因子试剂盒Multi-class antibodies规格:
Phospho-FLT3 (Tyr969) 磷酸化FMS样酪激酶3Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse rabbit IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗兔IgG 规格 0.5ml
MTX(Human methotrexate) ELISA Kit 人甲胺喋呤 96T
Syndecan 3 英文名称: Syndecan 3蛋白抗体 0.1ml
CEACAM21 英文名称: 癌胚抗原相关细胞粘附分子21抗体 0.2ml
Phospho-FLT3 (Tyr969) 磷酸化FMS样酪激酶3Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rabbit Monkey IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗猴IgM 0.1ml
FBXO31 英文名称: F-box蛋白家族FBXO31抗体 0.2ml
周期素C抗体 Cyclin C 0.1ml
PADI4/PAD4 /FITC 荧光素标记关节炎相关基因抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-VAV3(Tyr173) 磷酸化鸟嘌呤核苷酸交换因子VAV3抗体 规格 0.1ml
Rabbit rat IgM/Biotin 生物素化兔抗大鼠IgMMulti-class antibodies规格: 0.1ml
肺动脉成纤维细胞*培养基脘蛋白基因变异分析试剂盒20次人抗Ku抗体(anti-Ku-Ab)ELISA试剂盒, anti-Ku-Ab ELISA kit
活体细胞脘蛋白去糖基化试剂盒20次人抗肌动蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒,AAA ELISA
体外脘蛋白去糖基化试剂盒20次人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒, 人非甲基化寡核苷酸(NON)ELISA试剂盒,
体外脘蛋白转化(in vitro conversion)分析试剂盒50次人补体片断4b(C4b)ELISA试剂盒,
脘蛋白糖基化定性分析试剂盒5次小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒,
脘蛋白糖基化分型(glycoform)试剂盒5次小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒,
细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒,
载玻片细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次鱼促卵泡素
冻切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光10/20次白色(C.albicans)ELISA试剂盒--动物,人
显微镜检测试剂盒去氧胆酸盐枸椽酸盐乳糖蔗糖琼脂
石蜡切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光10/20次L-天冬酰一水
显微镜检测试剂盒L-缬甲酯盐酸盐
载玻片细胞β脘蛋白(PRION)蛋白表达NBT10/20次FMOC-L-天冬
显色光学显微镜检测试剂盒龙胆苦苷 Gentiopicroside
冻切片组织脘蛋白(PRION)蛋白表达NBT10/20次马脾铁蛋白
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