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产品名称:大鼠肝动脉内皮细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X10143
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于细胞而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
F VIII Ag ELISA Kit 大鼠第八因子相关抗原Multi-class antibodies规格: 48T
XAF1 XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh G Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1抗体 规格 0.2ml
BMP-6 ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白6 96T
Neurexin 2 英文名称: 轴突蛋白2抗体 0.2ml
APRG1 英文名称: 三号染色体开放阅读框抗体 0.2ml
XAF1 XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Osteocalcin 小鼠骨钙素Multi-class antibodies规格: 48T
Apo B 载脂蛋白B抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse rat IgG/Bio 生物素标记的小鼠抗大鼠IgG 规格 0.1ml
APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素 96T
SLAP 英文名称: SLAP蛋白抗体 0.1ml
C6orf192 英文名称: 8号染色体开放阅读框192抗体 0.2ml
Apo B 载脂蛋白B抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Goat Chicken IgG/FITC FITC标记的羊抗鸡IgG 0.3ml
FJX1 英文名称: 四连接同源蛋白FJX1抗体 0.2ml
骨保护蛋白/骨钙素抗体 BGP 0.1ml
NK-1/Substance P Receptor /FITC 荧光素标记P物质受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PPM1B 蛋白质磷酸酶1B抗体(PP2Cβ) 规格 0.2ml
WNK3 protein/FITC 荧光素标记丝/苏激酶家族成员的基因WNK3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
大鼠肝动脉内皮细胞*培养基高质敏感比色法定量检测试剂盒人包虫抗体IgG Elisa测定试剂盒
组织NADPH还原酶(NADPH Cytochrome C Reductase)活性20次石斛LAMP鉴定试剂盒
高质敏感比色法定量检测试剂盒鸦胆子LAMP鉴定试剂盒
β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)活性比色法定量检测试剂盒20次地榆LAMP鉴定试剂盒
羧酸酯酶(carboxylesterase)活性比色法定量检测试剂盒20次人神经特异性烯醇化酶(NSE)Elisa测定试剂盒
细胞谷氨酰半胱合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量检测试剂盒20次柿蒂探针法PCR鉴定试剂盒
组织谷氨酰半胱合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量检测试剂盒20次小茴香探针法PCR鉴定试
植物谷氨酰半胱合成酶(glutamyl systeine synthetase)活性比色法定量检测试剂盒20次人凝血因子Ⅸ(FⅨ)Elisa测定试剂盒
植物硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次制何首乌染料法PCR鉴定试剂盒
/酵母细胞硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次枳实染料法PCR鉴定试剂盒
藻类细胞硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次小鼠白介素16(IL-16)Elisa测定试剂盒
植物亚硝酸盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒20次小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)Elisa测定试剂盒
/酵母细胞亚硝酸盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒20次大鼠巨噬炎症蛋白5(MIP-5)Elisa测定试剂盒
藻类细胞亚硝酸盐还原酶总活性比色法定量检测试剂盒20次大鼠β素(BTC)Elisa测定试剂盒
植物铁型亚硝酸盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次大鼠血管生长素(ANG)Elisa测定试剂盒
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