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ARTICLES产品名称:小细胞肺癌细胞;NCI-H446
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:YS-02X9907
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 荧光素标记磷酸化染色体结构维持蛋白质1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 OPCML 1ml
SRRM2 英文名称: 丝酸/精酸相关核基质蛋白2抗体 0.1ml
phospho-EGFR (Tyr1016) 英文名称: 磷酸化表皮生长因子受体抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷受体2B抗体 规格 0.1ml
c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保护蛋白配体(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
CD6/TP120 CD6抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh p38MAPK/MAPK14/p38Alpha 原活化蛋白激酶p38α抗体 规格 0.1ml
F9 Kit Human 人 Coagulation Factor IX / FIX / F9 ELISA配对抗体 ELISA
TBX-5 英文名称: 转录因子Tbx5抗体 0.1ml
C20orf195 英文名称: 20号染色体开放阅读框195抗体 0.2ml
CD6/TP120 CD6抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Goat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗羊IgG 0.1ml
FPR1 英文名称: 基肽受体1抗体 0.1ml
脂肪酸结合蛋白2抗体 Fabp2 0.1ml
PG-C/FITC 荧光素标记胃蛋白酶原C抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TAK1(Ser412) 磷酸化转化生长因子β活化激酶1 规格 0.1ml
Mouse human IgG/Gold 金标记小鼠抗人IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies规格: 2ml
小细胞肺癌细胞;NCI-H446膜功能低渗膨胀法(HOST)检测试剂盒50次大鼠成纤维生长因子10(FGF-10)ELISA试剂盒,
DNA吖啶橙(acridine orange)荧光检测试剂盒50次大鼠糖原合成酶酶(GSK)ELISA试剂盒,
形态肖尔(shorr)染色试剂盒20次大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒,
精液粒性白细胞染色试剂盒50次大鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒,
精浆锌含量比色法定量检测试剂盒20次大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒,
精浆果糖含量比色法定量检测试剂盒20次猪E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒,
精浆中性α-糖苷酶(α-glucosidase)活性比色法定量检测试剂盒20次猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒,
细胞氧化应活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法50次猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒,
定量检测试剂盒猴载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒,
精液组分氧化应活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法50次马主要组织相容性复合体(MHC/ELA)ELISA试剂盒,
定量检测试剂盒兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒,
细胞氧化应活性氧(ROS)光泽精化学发光法50次兔溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒,
定量检测试剂盒兔过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒,
精液组分氧化应活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量50次兔子球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒,
检测试剂盒胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA试剂盒--动物,人
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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