产品中心
PRODUCTS CNTER相关文章
ARTICLES公司产品仅供科研使用,不得用于临床!
产品名称 | 英文名称 | 物种 |
粘着斑激酶(FAK)重组蛋白 | Recombinant Focal Adhesion Kinase (FAK) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介绍:
PTK2; FADK; FAK1; Pp125FAK; PPP1R71; Protein Tyrosine Kinase 2; Focal adhesion kinase-related nonkinase; Protein phosphatase 1 regulatory subunit 71 信号转导 酶与激酶 肿瘤免疫 物种:Homo sapiens (Human,人) 来源:原核表达 宿主E.coli 内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定) 亚细胞定位::细胞膜, 细胞质 预测分子量:30.5kDa 实际分子量:33kDa(差异分析请参阅说明书) 片段与标签:Gly798~Ala1041 with N-terminal His Tag 缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性状:冻干粉 纯度:> 97% 等电点:6.2 应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 规格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表达及纯化:
1.培养500ml哺乳动物细胞,然后将重组质粒转染到细胞中,通过瞬时表达产生目标蛋白。
2.收集含有目标蛋白的部分(细胞或培养上清)。
3.通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
相关产品:
Recombinant Human Ornithine Carbamoyltransferase宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
Recombinant Human Flagellin宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
Recombinant Human FAAH宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
Recombinant Human P4HA1宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
107个 | 0.5 mL~1 mL |
5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
GPR158产品名称: G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
WDR61产品名称: WD重复膜蛋白61抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
Hepatitis E Virus ORF2 antigen产品名称: 戊型毒ORF2抗原抗体标记: Unconjugated
IFIH1产品名称: 黑色su分化相关蛋白5抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
COQ5产品名称: 线粒体COQ5蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit, Sheep
ZDHHC2/ZNF372产品名称: 锌指蛋白372抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Monkey
EIF2S2产品名称: 真核启动因子2β抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
Involucrin产品名称: 囊包蛋白/内披蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
ITPR3产品名称: 5-三磷suan肌醇受体3抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
FAM167B产品名称: FAM167B蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
粘着斑激酶(FAK)重组蛋白人脯氨suan脱氢mei2(PRODH2)ELISA试剂盒PRODH2脯氨suan脱氢mei2elisa kitHuman Proline Dehydrogenase 2(PRODH2)ELISA Kit
人脯氨suan丰富蛋白4(PRR4)ELISA试剂盒PRR4脯氨suan丰富蛋白4ELISA试剂盒Human Proline Rich Protein 4, Lacrimal(PRR4)ELISA Kit
人脯氨suan/丝氨suan丰富卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)ELISA试剂盒PSRC1脯氨suan/丝氨suan丰富卷曲螺旋蛋白1elisamei联免疫试剂盒Human Proline/Serine Rich Coiled Coil protein 1(PSRC1)ELISA Kit
人脯氨suan/精氨suan丰富端亮氨suan丰富重复蛋白(PRELP)ELISA试剂盒PRELP脯氨suan/精氨suan丰富端亮氨suan丰富重复蛋白elisa检测试剂盒Human Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein(PRELP)ELISA Kit
人破骨细胞关联受体(OSCAR)ELISA试剂盒OSCAR破骨细胞关联受体elisa kitHuman Osteoclast Associated Receptor(OSCAR)ELISA Kit
上海市嘉定区澄浏公路52号
扫描微信号
Copyright © 2025 上海研生实业有限公司 版权所有 备案号:沪ICP备11012944号-18
技术支持:化工仪器网 管理登录 sitemap.xml