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产品名称:M2-型丙酮酸激酶(PKM2)活性蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Active Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)
M2PK; PKM; M2-PK; PKM1; CTHBP; OIP3; PK3; PKM; TCB; THBP1; Pyruvate kinase muscle isozyme; Thyroid hormone-binding protein 1; Cytosolic thyroid hormone-binding protein; Pyruvate Kinase, Muscle
酶与激酶
肿瘤免疫
物种:Homo sapiens (Human,人) 缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性状:冻干粉 纯度:> 97% 等电点:8.3 应用:Cellculture;ActivityAssays. 规格10μg50μg200μg1mg5mg |
特点:
标记:标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。
酶标记:酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高。
荧光标记:荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一,产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光, 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
相关产品:
核黄素激酶(RFK)重组蛋白Recombinant Adenylate Cyclase 10, Soluble (ADCY10)
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含自水解酶域蛋白6(ABHD6)重组蛋白Recombinant Citrate Synthase (CS)
标签选择:
亲和标签:蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用:一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易;另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类:一类是短肽类标签;一类是长肽以融合蛋白(fused partner)形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。
不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:
真核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体和宿主细胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表达载体的构建
c. 无内毒素的质粒抽提
d. 细胞瞬时转染
e. 表达小试,条件优化
f. 表达分析和鉴定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表达
h. 亲和纯化
i. 检测和鉴定
原核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体
b. 密码子优化
c. 基因合成/亚克隆
d. 转化表达菌株
e. 蛋白表达小试分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化
g. 如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。
h. 鉴定,包括SDS-PAGE和WB鉴定
GZMH蛋白;表达蛋白的分析、纯化、检测
诱导表达成功后,表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当,按一般的实验步骤做没太大的问题。
Gastrin产品名称: 胃泌su/蛙皮su抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit
MCM5产品名称: 微小染色体维持缺陷蛋白5抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
MAP3K8产品名称: 丝裂原活化蛋白激mei激mei8抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Phospho-PAK6 (Ser560)产品名称: p21激活激mei6抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
BCA2产品名称: 乳相关基因2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
USP1产品名称: 泛su特异性蛋白mei1抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PPP2R4产品名称: 蛋白磷suanmei2调节亚基4抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
SMRC2产品名称: SMRC2蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
ZNF681产品名称: 锌指蛋白681抗体交叉反应: Human
RAB27A产品名称: RAB27A蛋白单克隆抗体交叉反应: Human
M2-型丙酮酸激酶(PKM2)活性蛋白大鼠N-甲基-D-天氡氨suan离子能谷氨suan受体1(GRIN1)ELISA试剂盒GRIN1N-甲基-D-天氡氨suan离子能谷氨suan受体1elisa kitRat Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1(GRIN1)ELISA Kit
大鼠N-myc下游调节基因2(NDRG2)ELISA试剂盒NDRG2N-myc下游调节基因2ELISA试剂盒Rat N-myc Downstream Regulated Gene 2(NDRG2)ELISA Kit
大鼠Disabled同源物1(DAB1)ELISA试剂盒DAB1Disabled同源物1elisamei联免疫试剂盒Rat Disabled Homolog 1(DAB1)ELISA Kit
大鼠Dickkopf相关蛋白3(DKK3)ELISA试剂盒DKK3Dickkopf相关蛋白3elisa检测试剂盒Rat Dickkopf Related Protein 3(DKK3)ELISA Kit
大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA试剂盒BNIP3Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3elisa kitRat Bcl2/Adenovirus E1B 19kDa Interacting Protein 3(BNIP3)ELISA Kit
操作步骤 :
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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