牙周膜成纤维细胞*培养基公司正在销售的产品：Epsin2B蛋白抗体Anti-Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) /FITC 荧光素标记磷酸化磷酯酶Cγ2抗体IgG
表皮生长因子抗体Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser537)/FITC 荧光素标记磷酸化磷酯酶Cβ3抗体IgG
表皮生长因子样蛋白8抗体Anti-Phospho-PLC gamma 1 （S

产品名称：牙周膜成纤维细胞*培养基

规格：100mL/125mL×4
货号：YS-02X10109

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻"，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

NOS-3/eNOS /FITC 荧光素标记一氧化氮合成酶-3抗体(内皮型)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

 ZNF474/FITC 荧光素标记锌指蛋白474抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体  Caspase-6 0.1ml

Goat  Guinea pig IgG/APC APC标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

human Fibrinogen 英文名称： 人纤维蛋白原单克隆抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh POLA2 DNA聚合酶α2抗体 规格 0.2ml

 ZNF474/FITC 荧光素标记锌指蛋白474抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Ret AEA IgM ELISA Kit 抗大鼠内膜抗体IgMMulti-class antibodies规格： 48T

 phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin B抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh mu Opioid receptor μ-型受体抗体 规格 0.1ml

PL/Fbn(Human plasmin/fibrinolysin) ELISA Kit 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶 96T

SLFNL1 英文名称： SLFNL1抗体 0.2ml

CARD4 英文名称： 凋亡加强结构域蛋白4抗体 0.2ml

 phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin B抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Goat  Guinea pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗豚鼠IgG 0.1ml

Fbxw7 英文名称： Fbxw7蛋白抗体 0.2ml

白介素1-β转化酶样凋亡蛋白酶6抗体  Caspase-9 0.1ml

 Phospho-eNOS (Ser1177) /FITC 荧光素标记磷酸化一氧化氮合成酶3抗体(内皮型)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Pokemon 蒙蛋白抗体 规格 0.1ml

 ZW10 peptide/FITC 荧光素标记着丝粒蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
牙周膜成纤维细胞*培养基名称规格人多聚ADP核糖聚合酶（PARP）ELISA试剂盒,

血液样品固着液（Acetic alcohol固着液）50毫升P53（P53）ELISA试剂盒--动物，人

硬组织固着液（Susa 固着液）50毫升*1%亚碲酸钾溶液

软组织固着液（Bouin固着液）50毫升液体硫乙醇酸盐培养基    用于产气荚膜梭菌确证试验的培养（GB、SN标准）

骨组织固着液50毫升硝盐还原试剂盒

活检组织固着液50毫升9-氨基喜树碱 9-Aminocamptothecin

抗原保护固着液（10％中性Formalin 固着液）50毫升氯甲基树脂

荧光样品固着液（Michel固着液）50毫升根皮素 Phloretin

胃肠组织固着液（Hollande固着液）50毫升环氧长春碱  Vinleurosine

前列腺固着液（Hollande固着液）50毫升胡黄连苷I Amphicoside Ⅰ

肾组织固着液（BUBOSCQ-BRAZIL固着液）50毫升杆菌肽锌

脑组织固着液（Bouin固着液）50毫升次

肾上腺固着液（Orth固着液）50毫升移液器P50，单道大龙移液器P50

睾丸组织固着液（Bouin固着液）50毫升5.0ml冻存管

骨髓样品固着液（Helly或B5或Lowy FMA固着液）50毫升2-壬醇

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。