拓扑异构酶Ⅲ(TOP3)重组蛋白的相关产品:丙tongsuan脱氢mei磷suanmei(PDP)重组蛋白英文名称：Recombina Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)花生四烯suan-15-脂加氧mei(ALOX15)重组蛋白英文名称：Recombina Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)耐酒石suansua

蛋白表达及纯化：

1.培养500ml哺乳动物细胞，然后将重组质粒转染到细胞中，通过瞬时表达产生目标蛋白。

2.收集含有目标蛋白的部分（细胞或培养上清）。

3.通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

4.通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。

5.通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
公司产品仅供科研使用，不得用于临床！

商品介绍：

相关产品：

Recombinant Human FADS1宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombinant Human CHRNA1宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombinant Human NMT1宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human

Recombinant Human HOXC8宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human   

操作步骤：

Ⅰ 实体组织蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

2．  每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；

3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；

4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

Ⅱ 培养细胞蛋白提取

1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；

2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。

4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；

6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。

注意事项：

1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。

2、虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。

3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。

4、本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作 
Piwil2产品名称: piwi样2蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig

GPR49产品名称: G蛋白偶联受体49抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep

DAPK2产品名称: 凋亡相关蛋白激mei2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog

Ceramide glucosyltransferase产品名称: 葡萄糖神经酰胺合成mei抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

IL-4产品名称: 白介su4抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat

MEF2D产品名称: 肌细胞特异性增强因子2D抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow

Angiotensigen产品名称: 紧张su原抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat

应用类型: Other英文名称: CK18英文别名: K1C18_HUMAN; Keratin, type I cytoskeletal 18; KRT18; CYK18; Cell proliferation-inducing gene 46 protein; Cytokeratin-18 (CK-18); Keratin-18 (K18); PIG46; Keratin 18;

SV2B产品名称: 突触泡蛋白2B抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Rabbit

Lipoprotein lipase产品名称: 脂蛋白脂mei抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig   

拓扑异构酶Ⅲ(TOP3)重组蛋白人载脂蛋白O(APOO)ELISA试剂盒APOO载脂蛋白Oelisamei联免疫试剂盒Human Apolipoprotein O(APOO)ELISA Kit

人载脂蛋白M(APOM)ELISA试剂盒APOM载脂蛋白Melisa检测试剂盒Human Apolipoprotein M(APOM)ELISA Kit

人载脂蛋白L6(APOL6)ELISA试剂盒APOL6载脂蛋白L6elisa kitHuman Apolipoprotein L6(APOL6)ELISA Kit

人载脂蛋白L5(APOL5)ELISA试剂盒APOL5载脂蛋白L5ELISA试剂盒Human Apolipoprotein L5(APOL5)ELISA Kit

人载脂蛋白L4(APOL4)ELISA试剂盒APOL4载脂蛋白L4elisamei联免疫试剂盒Human Apolipoprotein L4(APOL4)ELISA Kit