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ARTICLES细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:胚肾上皮细胞;HKC
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:YS-02X9864
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
WNT10A/FITC 荧光素标记信号通路WNT10A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Collagen III ( Collagen Type III ) 抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
ATP结合蛋白家族6抗体 ABCB6 0.1ml
SRRM3 英文名称: 丝酸/精酸相关核基质蛋白3抗体 0.2ml
ENT2 英文名称: 核苷转运蛋白ENT2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉头蛋白家族1抗体 规格 0.1ml
Collagen III ( Collagen Type III ) 抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase) 线粒体促凋亡蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
BK channel BK通道蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PGC1 alpha + beta 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α+β抗体 规格 0.2ml
Epstein-Barr Virus/LMP 浓缩液 0.1ml 进口分装
Tetanus toxin light chain 英文名称: 破伤风轻链抗体 0.1ml
CD329 英文名称: CD329抗体 0.2ml
BK channel BK通道蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Donkey rabbit IgG/Bio 生物素标记的驴抗兔IgG 0.1ml
FKBP25 英文名称: 肽基脯酸异构酶酶FKBP25抗体 0.2ml
G蛋白偶联受体-2抗体 GASR 0.1ml
phospho-STAT1(pThr701)/FITC 荧光素标记抗磷酸化信号转导与转录激活因子1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SMC1 (Ser360) 磷酸化染色体结构维持蛋白质1抗体 规格 0.1ml
Mouse human IgM 小鼠抗人IgM (亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
胚肾上皮细胞;HKC细胞冻存试剂专题大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒,
名称规格大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒,
细胞冻存试剂盒50次大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒,
白细胞冻存试剂盒50次猪褪黑素(MT)ELISA试剂盒,
胚胎干细胞(ES)冻存试剂盒50次猴胰岛素(INS)ELISA试剂盒,
重组逆转录病毒稳态表达细胞克隆冻存试剂盒50次鹿红膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒,
细胞凋亡试剂专题兔子脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒,
名称规格盐增菌液(SF)
通用型细胞周期流式细胞分析试剂盒100次金丝桃素 Hypericin
细胞周期蓝色荧光流式细胞分析试剂盒100次人尿蛋白(UP)ELISA试剂盒,
(紫外波长,无需固定和透膜处理)人肌球蛋白重链(MHC)ELISA试剂盒,
细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂盒100次人球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA试剂盒,
细胞TUNEL显色法(DAB)测定试剂盒10/20次人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒,
冻切片TUNEL显色法(DAB)测定试剂盒10次小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒,
石蜡切片TUNEL显色法(DAB)测定试剂盒10次大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒,
上海市嘉定区澄浏公路52号
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