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ARTICLES产品名称:晶状体上皮细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X10100
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
HSP-70 ELISA Kit 大鼠热休克蛋白70Multi-class antibodies规格: 48T
人T细胞亚群检测盒 人T细胞亚群检测盒 (T-Subset)Multi-class antibodies规格: 100人份
Rhesus antibody Rh FRMD8 FRMD8蛋白抗体 规格 0.2ml
Flt3(Mouse FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 小鼠FMS样酪酸激酶3 96T
Sodium / Hydrogen Exchanger 1 英文名称: 钠氢通道蛋白抗体 0.2ml
APC11 英文名称: 细胞周期后期促进蛋白亚基11抗体 0.2ml
人T细胞亚群检测盒 人T细胞亚群检测盒 (T-Subset)Multi-class antibodies规格: 100人份
sTNF Alpha-RII(humen) 大鼠可溶性坏死因子-受体2Multi-class antibodies规格: 48T
DTNBP1 精神分裂症易感基因抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NBL1/DAND1 神经母细胞瘤抑瘤蛋白1抗体 规格 0.1ml
Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人补体片断3a 96T
SMAGP 英文名称: 小细胞跨膜糖化蛋白抗体 0.1ml
CD6 英文名称: CD6抗体 0.2ml
DTNBP1 精神分裂症易感基因抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Goat rat IgG/Cy7 Cy7标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml
FNDC8 英文名称: Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白8抗体 0.2ml
CC趋化因子受体3抗体 CCR-3 0.2ml
Phospho-NPM (Thr95)/FITC 荧光素标记磷酸化核仁磷酸蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体 规格 0.2ml
HBeAg/FITC 荧光素标记小鼠抗人乙肝e抗原抗体(1)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
晶状体上皮细胞*培养基石蜡切片中性脂质油红O间接染色试剂盒10次D-α-氨基氧化酶
石蜡切片中性脂质油红O直接染色试剂盒50次茄尼醇 Solanesol
冻切片中性脂质油红O染色试剂盒50次α-甲基-D-甘露糖苷
细胞总胆固醇高氯酸萘醌(PAN)染色试剂盒50次活性碳
石蜡切片总胆固醇高氯酸萘醌(PAN)间接染色试剂盒10次微量可调移液器P100
石蜡切片总胆固醇高氯酸萘醌(PAN)直接染色试剂盒50次水杨酸酯
冻切片总胆固醇高氯酸萘醌(PAN)染色试剂盒50次邻甲
细胞游离胆固醇毛地黄皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌50次3-氟
(PAN)染色试剂盒海滨芽孢杆菌多少钱
石蜡切片游离胆固醇毛地黄皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)间接染色试剂盒10次人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA试剂盒,Secretin ELISA kit
石蜡切片游离胆固醇毛地黄皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)直接染色试剂盒50次人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)ELISA试剂盒,RNP-Ab ELISA
冻切片游离胆固醇毛地黄皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)染色试剂盒50次人抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒,ATGA/TGAB ELISA
细胞总胆固醇舒尔茨染色试剂盒50次人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒,
石蜡切片总胆固醇舒尔茨间接染色试剂盒10次豚鼠单核趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒,
石蜡切片总胆固醇舒尔茨直接染色试剂盒50次鱼类白介素1α
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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