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产品名称:胰岛β细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X9993
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
TSLPR/CRLF2/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠胸腺基质细胞生成素受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CASP4(Caspase-4) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
X射线修复交叉互补蛋白/细胞碱基切除修复基因抗体 XRCC1 0.1ml
SIPA1 英文名称: 信号诱导增殖相关蛋白1抗体 0.2ml
Phospho-ELk1(Ser383) 英文名称: 磷酸化细胞转录因子ELK1抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体 规格 0.1ml
CASP4(Caspase-4) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
NGF 小鼠神经生长因子Multi-class antibodies规格: 48T
human Fibrinogen 人纤维蛋白原抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Rabbit IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的小鼠抗兔IgM 规格 0.1ml
人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH) ELISA Kit 人烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 96T
Sumo 3 英文名称: 泛素样蛋白Sumo3抗体 0.2ml
C1orf201 英文名称: 1号染色体开放阅读框201抗体 0.2ml
human Fibrinogen 人纤维蛋白原抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Goat Mouse IgM/APC APC标记的羊抗小鼠IgM 0.1ml
FCER1G 英文名称: 球蛋白E受体Fc ε RIγ抗体 0.2ml
结缔组织生长因子抗体 CTGF 0.1ml
phospho-P53 (Ser33) /FITC 荧光素标记磷酸化抑制基因P53抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-YB1(Ser102) 磷酸化DNA结合蛋白B抗体 规格 0.1ml
Rabbit guinea pig IgG/Biotin 生物素化兔抗豚鼠IgGMulti-class antibodies规格: 0.1ml
胰岛β细胞*培养基胞核微型RNA(Pre-RNA)电泳法分离试剂盒20次小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒,
胞核微型RNA(Pre-RNA)超滤法分离试剂盒10次小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒,
微型RNA(miRNA)扩增试剂盒20次兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒,
通用型微型RNA(miRNA)扩增试剂盒20次BDS培养基
微型RNA(miRNA)定量扩增分析试剂盒10/20次D-赖盐酸盐
通用型微型RNA(miRNA)定量扩增分析试剂盒10/20次阿魏酸 Ferulic Acid
微型RNA(miRNA)北方杂交试剂盒5次二氢丹参酮 I Dihydrotanshinone I
微型RNA(miRNA)酶保护分析试剂盒5次环孢菌素D Cyclosporin D
微型RNA(miRNA)文库构建技术试剂盒5次Taq plus酶
特定微型RNA目标基因探测技术试剂盒5次SP6 RNA聚合酶
微型RNA(miRNA)同位素探针制备试剂盒10次2′-脱氧鸟苷-5′-二磷酸三钠盐
特定微型RNA(miRNA)扩增引物合成2 U萘酚AS-TR磷酸盐
特定成熟微型RNA(miRNA)分子合成2 U人结肠癌抗原(CCA)ELISA试剂盒,CCA ELISA kit
特定成熟微型RNA(miRNA)反义抑制剂合成2 U人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)ELISA试剂盒, ANNA-1/Hu EL
特定成熟微型RNA(miRNA)2位修饰抑制剂合成2 U人抗肝肾微粒体抗体(LKM)ELISA试剂盒,LKM ELISA
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