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二肽酶3(DPEP3)重组蛋白
产品简介

二肽酶3(DPEP3)重组蛋白公司正在出售的产品:非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒African Swine Fever Virus(ASFV)肥胖带绦虫PCR检测试剂盒Taenia saginataPCR肥胖带绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒Taenia saginata肺孢子虫通用PCR检测试剂盒Pneumocystis spp.PCR肥胖带绦虫PCR检测试剂盒Taenia saginat

更新时间:2023-03-22
厂商性质:经销商
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公司产品仅供科研实验产品属性:

产品名称:二肽酶3(DPEP3)重组蛋白   

物种:Homo sapiens (Human,人)

英文名称:Recombinant Dipeptidase 3 (DPEP3)

MBD3

酶与激酶

物种:Homo sapiens (Human,人)

来源:原核表达

宿主E.coli

内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位::细胞膜

预测分子量:36.1kDa

实际分子量:36kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:Glu196~Cys488 with N-terminal His Tag

缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性状:冻干粉

纯度:> 95%

等电点:5.9

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格10μg50μg200μg1mg5mg

特点:

标记:标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。

酶标记:酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高。

荧光标记:荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一,产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光, 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。

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Recombinant Rat Carboxypeptidase A宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Rat

图片6.png


标签选择:

亲和标签:蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用:一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易;另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类:一类是短肽类标签;一类是长肽以融合蛋白(fused partner)形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。

不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:

真核表达系统的重组蛋白表达步骤:

a.      选择表达载体和宿主细胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表达载体的构建

c.      无内毒素的质粒抽提

d.      细胞瞬时转染

e.      表达小试,条件优化

f.       表达分析和鉴定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表达

h.      亲和纯化

i.        检测和鉴定

原核表达系统的重组蛋白表达步骤:

a.      选择表达载体

b.      密码子优化

c.      基因合成/亚克隆

d.      转化表达菌株

e.      蛋白表达小试分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化

g.      如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。

h.      鉴定,包括SDS-PAGE和WB鉴定

GZMH蛋白;表达蛋白的分析、纯化、检测

  诱导表达成功后,表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当,按一般的实验步骤做没太大的问题。

应用类型: Methylated英文名称: Gentamicin(3G7)英文别名: Garamycin; Gentamicin sulfate salt; Gentamycin; Gentiomycin C.

应用类型: Other英文名称: ERCC1标记: Unconjugated

GAB4产品名称: 生长因子受体结合蛋白2相关蛋白4抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

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操作步骤

根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品: 把切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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