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产品名称:DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant DNA Methyltransferase 3A (DNMT3A)
DNMT3A2; M.HsaIIIA; DNA methyltransferase HsaIIIA
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人) 来源:原核表达 宿主E.coli 内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定) 亚细胞定位::细胞核, 细胞质 预测分子量:35.7kDa 实际分子量:38kDa(差异分析请参阅说明书) 片段与标签:Ile634~Val912 with N-terminal His Tag 缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性状:冻干粉 纯度:> 97% 等电点:8.5 应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 规格10μg50μg200μg1mg5mg |
特点:
标记:标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。
酶标记:酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高。
荧光标记:荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一,产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光, 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
相关产品:
2',3'-环核苷suan3'-磷suan二酯mei(CNP)重组蛋白英文名称:Recombina 2',3'-Cyclic Nucleotide 3'-Phosphodiesterase (CNP)α1,4-半乳糖基转移mei(a4GALT)重组蛋白英文名称:Recombina Alpha-1,4-Galactosyltransferase (a4
标签选择:
亲和标签:蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用:一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易;另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类:一类是短肽类标签;一类是长肽以融合蛋白(fused partner)形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。
不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:
真核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体和宿主细胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表达载体的构建
c. 无内毒素的质粒抽提
d. 细胞瞬时转染
e. 表达小试,条件优化
f. 表达分析和鉴定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表达
h. 亲和纯化
i. 检测和鉴定
原核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体
b. 密码子优化
c. 基因合成/亚克隆
d. 转化表达菌株
e. 蛋白表达小试分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化
g. 如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。
h. 鉴定,包括SDS-PAGE和WB鉴定
GZMH蛋白;表达蛋白的分析、纯化、检测
诱导表达成功后,表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当,按一般的实验步骤做没太大的问题。
KAP15.1产品名称: 角蛋白相关蛋白15.1抗体交叉反应: Human
Propionyl-Histone H4 (Lys16)交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗体来源: Mouse
phospho-GABBR2 (Ser892)产品名称: GB型受体2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow
GPR142产品名称: G蛋白偶联受体GPR142蛋白抗体交叉反应: Human
EIF2S1产品名称: EIF2S1单克隆抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
Galectin 8产品名称: 半乳糖凝集su8抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat
CAPNS1产品名称: CAPNS1单克隆抗体交叉反应: Human
C11ORF67产品名称: 11号染色体开放阅读框67抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
应用类型: Other英文名称: CBX4英文别名: CBX 4; CBX4_HUMAN; E3 SUMO-protein ligase CBX4; EC:2.3.2.-; Chromobox protein homolog 4; Polycomb 2 homolog (Pc2; hPc2); Pc2; hPc2;
C7orf34产品名称: 7号染色体开放阅读框34抗体交叉反应: Human
DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)重组蛋白人假尿苷suan合mei10(PUS10)ELISA试剂盒PUS10假尿苷suan合mei10elisa检测试剂盒Human Pseudouridylate Synthase 10(PUS10)ELISA Kit
人假尿苷suan合mei1(PUS1)ELISA试剂盒PUS1假尿苷suan合mei1elisa kitHuman Pseudouridylate Synthase 1(PUS1)ELISA Kit
人钾中间小电导钙激活通道蛋白亚家族N成员2(KCNN2)ELISA试剂盒KCNN2钾中间小电导钙激活通道蛋白亚家族N成员2ELISA试剂盒Human Potassium Intermediate Small Conductance Calcium Activated Channel Subfamily N, Member 2(KCNN2)ELISA Kit
人钾氯协同转运蛋白4(KCC4)ELISA试剂盒KCC4钾氯协同转运蛋白4elisamei联免疫试剂盒Human Potassium Chloride Cotransporters 4(KCC4)ELISA Kit
人钾氯协同转运蛋白3(KCC3)ELISA试剂盒KCC3钾氯协同转运蛋白3elisa检测试剂盒Human Potassium Chloride Cotransporters 3(KCC3)ELISA Kit
操作步骤 :
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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