小鼠胚胎细胞;NIH/3T3公司正在销售的产品：磷酸化丝切蛋白抗体Anti-Phospho-Rb (Thr821) 磷酸化视网膜母瘤相关蛋白1抗体
磷酸化周期检测点酶2抗体Anti-secretory IgA 分泌型球蛋白A抗体
磷酸化分裂周期蛋白25抗体Anti-RECK 金属蛋白酶抑制因子RECK抗体
磷酸化分裂周期蛋白25抗体Anti-REG4/RELP 再生基因蛋白4抗体

产品名称：小鼠胚胎细胞;NIH/3T3

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9680

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻"，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
Ntn1/FITC 荧光素标记轴突导向因子1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Goat  human IgA/HRP 辣根过氧化物酶标记羊抗人IgAMulti-class antibodies规格： 0.1ml

CD45抗体  CD45 0.1ml

Goat  Mouse IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗小鼠IgG 0.1ml

Factor XI light chain 英文名称： 凝血因子11轻链抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLEKHM1 石骨症相关蛋白PLEKHM1抗体 规格 0.2ml

Goat  human IgA/HRP 辣根过氧化物酶标记羊抗人IgAMulti-class antibodies规格： 0.1ml

IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-Human 干扰素-γ多肽抗原(人)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

 Phospho-CDC42 (Ser71) 磷酸化细胞分化周期CDC42蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Omgp 少突细胞髓磷脂糖蛋白抗体 规格 0.1ml

KLK3 Kit Human 人 KLK3 / Kallikrein 3 ELISA配对抗体 ELISA

Torsin B 英文名称： 扭转蛋白B抗体 0.2ml

Calumenin 英文名称： 钙腔蛋白 0.1ml

 Phospho-CDC42 (Ser71) 磷酸化细胞分化周期CDC42蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Phospho-SHP2 (Tyr81) 英文名称： 磷酸化蛋白酪酸磷酸酶2抗体 0.1ml

FBRSL1 英文名称： 乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白9抗体 0.2ml

原活化蛋白激酶激酶1  MAPKK1 0.1ml

 RhoA /FITC 荧光素标记RhoA抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PIM1(Tyr218) 磷酸化前病毒整合位点蛋白1抗体 规格 0.1ml

TP-5(Thymopentin) 胸腺五肽Multi-class antibodies规格： 0.5mg
小鼠胚胎细胞;NIH/3T36-氨基荧光素猪胰岛素原色素P450亚酶CYP3A4（BFCD）活性荧光定量检测试剂盒

5(6)-氨基荧光素人绝经尿促性素 (HMG)体外非系统色素P450亚酶CYP3A4（BFCD）活性荧光定量检测试剂盒

5-FAM, SE；5-羧基荧光素琥珀酰亚酯人胰岛素色素P450亚酶CYP2A6（COUMARIN）活性荧光定量检测试剂盒

5,6-FAM；5(6)-羧基荧光素缩宫素(合成)体外非系统色素P450亚酶CYP2A6（COUMARIN）活性荧光定量检测试剂盒

5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基荧光素琥珀酰亚酯促甲状腺素（TSH）色素P450亚酶CYP2B6（EFC）活性荧光定量检测试剂盒

S-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷甲硫氨酸促黄体生成（LH）体外非系统色素P450亚酶CYP2B6（EFC）活性荧光定量检测试剂盒

磺间甲氧嘧啶泌乳素色素P450亚酶CYP2C8（DBF）活性荧光定量检测试剂盒

磺间甲氧嘧啶(标准品)促卵泡生成素体外非系统色素P450亚酶CYP2C8（DBF）活性荧光定量检测试剂盒