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产品名称：猫肾细胞;CRFK

规格：1×10⁶cells/T25培养瓶
货号：YS-02X9579

细胞生长实验 ：细胞生长良好，形态正常

储存条件：2℃-8℃，避光储存

运输条件：冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备RPMI-1640 培养基；优质胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

注意事项：

（1）冻存前细胞状态，细胞最好在对数生长期，细胞密度适合，刚刚发生细胞融合，过密或连成片的细胞状态不好，而且消化时不容易分散；

（2）冻存的密度不宜过低，10的6次方-7次方的数量级比较好，我冻存的细胞一般T25培养瓶（5*107），一瓶冻一管（1.5ml冻存管），10cm培养皿（大概10的8次方个细胞）分成两管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化过度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦，不是加入冻存液再吹打。

（4）离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格，我从10%-90%都用过，问题不大，个人认为10%-20%可以了，能节约处就节约点嘛！另外，冻存液可以在处理细胞前配置，放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬，移入冻存管。

（5）关于“慢冻"，传统的方法，LLC细胞冻存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更长，-80度过夜，最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室，推荐使用程序降温盒，内装异丙醇，在-80度并内可以逐渐降温，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步骤：

一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。

（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。

（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。

（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。

细胞特性：

1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。

2)细胞鉴定：细胞免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
Plectin/FITC 荧光素标记网蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rat IgG (亲和纯化) 大鼠IgGMulti-class antibodies规格： 1mg

高迁移率族蛋白-1抗体  HMGB1 0.1ml

Goat  Guinea pig IgG 羊抗豚鼠IgG 1mg

FGF8 英文名称： 成纤维细胞生长因子8抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-RelB(Ser573) 磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体 规格 0.1ml

Rat IgG (亲和纯化) 大鼠IgGMulti-class antibodies规格： 1mg

HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 热休克蛋白90α抗体Multi-class antibodies规格： 0.5mg

 phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-CHEK1 (Ser280) 磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体 规格 0.1ml

兔抗猪IgG血清 0.5ml 国产

Wnt11 英文名称： 信号通路Wnt11抗体 0.1ml

Phospho-Doublecortin (Ser128) 英文名称： 磷酸化双皮质素抗体 0.1ml

 phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

synaptotagmin-2 英文名称： 突触结合蛋白相关基因2抗体 0.1ml

phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222 + Ser226) 英文名称： 磷酸化原活化蛋白激酶1抗体 0.1ml

CD3抗体  CD3 0.1ml

 VDCC-L Beta/FITC 荧光素标记L-型电压依赖型钙通道β抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-GSK3 alpha(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α抗体 GSK3α(Phospho-Ser21) 规格 0.1ml

CD62L (ELAM-1/L-Selectin ) L选择素抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
猫肾细胞;CRFK岩藻糖；L-岩藻糖卷柏(垫状卷柏）PH4-5显色（BROMOCRESOL GREEN）指示溶液

果胶酶麦芽PH5-6显色（CHLOROPHENOL RED）指示溶液

β-淀粉酶(70万u/ml液体)花椒PH6-7显色（BROMOTHYMOL BLUE）指示溶液

β-淀粉酶(酶活5万粉末)芦根PH7-8显色（PHENOL RED）指示溶液

DNA酶,脱氧核糖核酸酶Ⅰ扶芳藤PH8-9显色（THYMOL BLUE）指示溶液

高峰淀粉酶来源于米曲霉(4000U/g)伸筋草PH9-10显色（THYMOLPHTHALEIN）指示溶液

高峰淀粉酶来源于米曲霉(100U/mg )鸡冠花P11-12显色（SULFO ORANGE）指示溶液

甘油-3-磷酸脱氢酶苦楝皮（楝）线虫繁殖培养试剂盒