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产品名称:大鼠成骨细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X10200
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于细胞而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
PTHrP ELISA Kit 大鼠甲状旁腺相关蛋白Multi-class antibodies规格: 48T
VPS18 空泡分选蛋白18抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCDFP15 特异性囊肿病液体蛋白15抗体 规格 0.2ml
ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人活化素A 96T
Phospho-NFKBIA (Tyr42) 英文名称: 磷酸化IKB α抗体 0.1ml
AANAT 英文名称: 芳香胺N-乙酰化转移酶抗体 0.2ml
VPS18 空泡分选蛋白18抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
MIP-5 大鼠巨噬细胞炎性蛋白-5Multi-class antibodies规格: 48T
EAAT1/Glast 胶质细胞谷运载蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Nadrin 神经细胞发育相关调控蛋白抗体 规格 0.2ml
TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit 人T细胞受体 96T
SECTM1 英文名称: 分泌和跨膜蛋白1抗体 0.1ml
Caspase-6 (NT) 英文名称: 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端) 0.1ml
EAAT1/Glast 胶质细胞谷运载蛋白1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Mouse human IgM/Cy5 Cy5标记的小鼠抗人IgM 0.1ml
GSDML 英文名称: GSDML蛋白抗体 0.2ml
α-甲基酰基A消旋酶抗体 AMACR/P504S 0.2ml
NCoR2/FITC 荧光素标记核受体辅助抑制因子2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ProSAPiP1 含脯突触相关蛋白相互作用蛋白1抗体 规格 0.2ml
VDCC-L alpha/FITC 荧光素标记L-型电压依赖型钙通道α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
大鼠成骨细胞*培养基检测试剂盒小鼠5羟色(5-HT)Elisa测定试剂盒
植物镁ATP酶(Mg++ -ATPase)活性比色法定量20次大鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)Elisa测定试剂盒
检测试剂盒猪可溶性间粘附分子1(sICAM-1)Elisa测定试剂盒
动物细胞氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法20次兔子神经营养因子4(NT-4)Elisa测定试剂盒
定量检测试剂盒钙/钙调素依赖蛋白酶2α抗体流式组化
动物组织氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法20次载脂蛋白A1抗体流式组化
定量检测试剂盒家族受体α-1抗体流式组化
氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次热休克蛋白-27抗体流式组化
酵母氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次神经肽Y1受体抗体流式组化
植物氢/钾ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次孕素诱导阻断因子抗体流式组化
动物细胞氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次核突触蛋白-α抗体流式组化
动物组织氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20微管相关蛋白抗体流式组化
氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次新型抑癌基因抗体流式组化(一种新发现的抑癌基因)IHC WB
酵母氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次L-谷氨酰
植物氢ATP酶(H+-ATPase)总活性比色法定量检测试剂盒20次D-高丙
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