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ARTICLES产品名称:视网膜上皮细胞;ARPE-19
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:YS-02X9535
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
Proteasome 20S LMP7 /FITC 荧光素标记低分子质量蛋白7抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit MK IgM Whole serum 兔抗猴IgM抗血清Multi-class antibodies规格: 1ml
白介素2抗体 IL-2 0.1ml
Rabbit human IgM whole serum 兔抗人IgM抗血清 1ml
FBXO2 英文名称: F-box蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化抑制基因PTEN抗体 规格 0.1ml
Rabbit MK IgM Whole serum 兔抗猴IgM抗血清Multi-class antibodies规格: 1ml
LIF peptide 白血病抑制因子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烃受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CaM I (Ser 101) 磷酸化钙调节素抗体 规格 0.1ml
过氧化物酶阻断剂A 10ml 推荐用于冻切片,孵育20-30分钟.
VNN2 英文名称: 血管非炎性蛋白2抗体 0.2ml
DHCR7 英文名称: 7脱氢胆固醇还原酶抗体 0.2ml
Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烃受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Slit1 英文名称: 多重表皮生长因子样蛋白4抗体 0.2ml
EAAT1 英文名称: 胶质细胞谷酸运载蛋白1抗体 0.1ml
半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体(人) Caspase-12 0.1ml
Phospho-TNK1 (Tyr277)/FITC 荧光素标记磷酸化非受体型酪氨酸蛋白激酶Tnk1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HSF1(Ser303) 磷酸化热休克因子1抗体 规格 0.2ml
MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬细胞炎性蛋白3α抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
视网膜上皮细胞;ARPE-19(R)-(-)-2-苯酸(>98.0%(GC)(T))亥茅酚苷环境无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂盒
(R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC))人参皂苷 Rb2多巴(dopamine)比色法定量检测试剂盒
(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC))1,5-O-二咖啡酰奎宁酸组织多巴(dopamine)比色法定量检测试剂盒
2,3,4,6--O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖基异硫酸酯(>98.0%(HPLC))白屈菜红碱体液多巴(dopamine)比色法定量检测试剂盒
N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟脑磺内酰(>98.0%(HPLC)(T))人参皂苷 Rf半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒
N-(2-羧基-4,5-二氯苯甲酰)-(-)-10,2-樟脑磺内酰(>98.0%(HPLC)(T))木犀草苷组织半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒
对茴香酸(>99.0%(GC)(T))冬凌草甲素血滤纸片样品半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒
9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))地肤子皂苷 Ic体液半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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