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产品名称:肠动脉内皮细胞*培养基
规格:100mL/125mL×4
货号:YS-02X10007
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 荧光素标记衰老标记蛋白30抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Bursin 囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽Multi-class antibodies规格: 100mg
抗蚯溶酶抗体/抗激酶抗体 Lumbrokinase 0.1ml
Selenium Binding Protein 1 英文名称: 硒结合蛋白1抗体 0.2ml
FOXB1 + FOXB2 英文名称: 叉头蛋白B1+B2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PKC gamma (Thr514) 磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体 规格 0.1ml
Bursin 囊素三肽/三肽囊素/鸡法氏囊三肽Multi-class antibodies规格: 100mg
IL-3 小鼠白介素-3Multi-class antibodies规格: 48T
EPOR 红细胞生成素受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh mTOR/FRAP 雷帕霉素靶蛋白抗体 规格 0.1ml
CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人补体调节蛋白 96T
STOM 英文名称: 红细胞膜蛋白STOM抗体 0.2ml
CD11b 英文名称: 整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体 0.1ml
EPOR 红细胞生成素受体抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Mouse rabbit IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗兔IgG 0.1ml
FLRT2 英文名称: 富含亮酸跨膜纤连蛋白2抗体 0.2ml
抗Ⅹ型胶原抗体 CollagenⅩ 0.2ml
Mtp53/FITC 荧光素标记突变型P53抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PIBF1/C13orf24 孕酮诱导阻断因子1抗体 规格 0.2ml
Goat Chicken IgG/Biotin 生化羊抗鸡IgGMulti-class antibodies规格: 0.1ml
肠动脉内皮细胞*培养基人体CYCLIN D1 RFLP基因分析试剂盒20次癸烷磺酸钠
人体CYP1A2 RFLP基因分析试剂盒20次第威德合金
人体Methyl tetrahydrofolate reductase RFLP基因分析试剂盒20次人神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒,NT-4 ELISA kit
人体Hemoglobin E RFLP基因分析试剂盒20次人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA试剂盒,MART/Melan-A ELISA
人体HLA-DPB1 RFLP基因分析试剂盒20次人转谷氨酰酶2C多肽(TGM2)ELISA试剂盒,TGM2 ELISA kit
人体Interleukin-4-receptor alpha RFLP基因分析试剂盒20次人抗胸腺球蛋白(ATG)ELISA试剂盒, ATG ELISA kit
人体c-Ki-ras RFLP基因分析试剂盒20次人腺病IgG(ADV-IgG)ELISA试剂盒,ADV-IgG ELISA
人体MMP3 RFLP基因分析试剂盒20次人肽释放酶10(KLK 10)ELISA试剂盒,
人体MMP9 RFLP基因分析试剂盒20次人丙酮酸酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒,
人体TNF-βRFLP基因分析试剂盒20次人血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)ELISA试剂盒,
Borrelia burgdorferi RFLP基因分析试剂盒20次人ras同源物基因家族成员b(RHOB)ELISA试剂盒,
Toxoplasma gondii RFLP基因分析试剂盒20次人补体3裂解产物(C3SP)ELISA试剂盒,
Trypanosoma congolense RFLP基因分析试剂盒20次小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒,
Hepatitis B virus RFLP基因分析试剂盒20次小鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒,
Human cytomegalovirus (HCMV)RFLP基因分析试剂盒20次大鼠周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒,
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