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产品名称:胆盐依赖性脂肪酶(BSDL)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Lipase, Bile Salt Dependent (BSDL)
CEL; FAP; BAL; BSSL; FAPP; LIPA; MODY8; Carboxyl Ester Lipase; Bile salt-stimulated lipase; Bucelipase; Cholesterol esterase; Pancreatic lysophospholipase; Sterol esterase
酶与激酶
代谢通路
感染免疫
肝胆病学
物种:Homo sapiens (Human,人) 来源:原核表达 宿主E.coli 内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定) 亚细胞定位::分泌 预测分子量:53.4kDa 实际分子量:56kDa(差异分析请参阅说明书) 片段与标签:Asp117~Glu361 with N-terminal His and GST Tag 缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性状:冻干粉 纯度:> 97% 等电点:6.5 应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 规格10μg50μg200μg1mg5mg |
特点:
标记:标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。
酶标记:酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高。
荧光标记:荧光基团AbFluorTM是新型的荧光标记物之一,产品覆盖350-770nm。不同的AbFluor基团经恰当的激光可发光, 从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平定位的方法。
相关产品:
Recombinant Human DPP3宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
Recombinant Human HCN4宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
Recombinant Human MYPT1宿主: E.Coli标签: N-terminal His Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
Recombinant Human GPRIN1宿主: E.Coli标签: N-terminal His-IF2DI Tag规格: 50μg, 200μg, 1mg种属: Human
标签选择:
亲和标签:蛋白重组表达过程中采用亲和标签融合表达有两方面的作用:一方面是为了使蛋白纯化过程变得更加容易;另一方面是为了促进某些不溶性蛋白可溶。蛋白标签可分两类:一类是短肽类标签;一类是长肽以融合蛋白(fused partner)形式共表达。使用不同的蛋白标签需要根据具体案例来分析。
不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:
真核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体和宿主细胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表达载体的构建
c. 无内毒素的质粒抽提
d. 细胞瞬时转染
e. 表达小试,条件优化
f. 表达分析和鉴定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表达
h. 亲和纯化
i. 检测和鉴定
原核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体
b. 密码子优化
c. 基因合成/亚克隆
d. 转化表达菌株
e. 蛋白表达小试分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化
g. 如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。
h. 鉴定,包括SDS-PAGE和WB鉴定
GZMH蛋白;表达蛋白的分析、纯化、检测
诱导表达成功后,表达蛋白的分析、纯化、检测应该顺当,按一般的实验步骤做没太大的问题。
应用类型: Other英文名称: CD7英文别名: CD7 antigen (p41); CD7 molecule; CD7_HUMAN; T-cell Perilipin-2产品名称: 脂肪分化相关蛋白抗体交叉反应: Human
Adiponectin receptor 2产品名称: 脂联su受体2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig
应用类型: Other英文名称: AIF1 (9A3)英文别名: AIF 1; AIF1; AIF1 protein; IBa1; iba-1; IBa CD46产品名称: 膜辅蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse
CD41/ITGA2B产品名称: 小板膜糖蛋白Ⅱb(CD41)抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
RIP2产品名称: 受体结合丝氨suan苏氨suan激mei2抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig
VMAT2产品名称: 脑单胺类神经递质转运蛋白抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
Aromatase产品名称: 芳香化mei/细胞色suP450/雌激su合成mei抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
TLR7产品名称: Toll样受体7抗体交叉反应: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
胆盐依赖性脂肪酶(BSDL)重组蛋白人α/β干扰su受体(IFN-α/βR)ELISA试剂盒IFN-α/βRα/β干扰su受体elisa kitHuman Interferon α/βReceptor,IFN-α/βR ELISA Kit
人Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)ELISA试剂盒ZBP1Z-DNA结合蛋白1ELISA试剂盒human ZBP1 ELISA KIT
人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒XCR1XC趋化因子受体1elisamei联免疫试剂盒Human XC-chemokine receptor 1,XCR1 ELISA Kit
人v-rel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物B(RelB)ELISA试剂盒RelBv-rel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物Belisa检测试剂盒Human RelB ELISA Kit
人vav3核苷suan交换因子(VAV3)ELISA试剂盒VAV3vav3核苷suan交换因子elisa kitHuman VAV3 ELISA Kit
操作步骤 :
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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