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ARTICLES商品属性:

产品名称 | 大鼠脊髓神经元细胞品牌 | 英文名称 | Rat Spinal Cord Neurons |
产品规格 | 5×10^5 | 货号 | YS-01X7451 |
产品信息:

产品名称 大鼠脊髓神经元细胞
组织来源 脊髓组织
产品规格 5×10^5Cells/T25
细胞简介 大鼠脊髓神经元细胞分离自脊髓组织;脊髓是细细的管束状的神经结构,位于脊柱的椎管内且被脊椎保护;是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分,在椎管里面,上端连接延髓,两旁发出成对的神经,分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区,主要由神经细胞构成;在灰质区周围为白质区,主要由有髓神经纤维组成;脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路,也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节,31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统基本的结构和功能单位是神经元,即神经细胞,其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体,内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示,在光镜下是灰蓝色斑块状,称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起,能在神经元之间传递电冲动,突起的大小和形态各不相同,很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞,神经元含量少,分离纯化难度大,且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞,不能分裂增殖,培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形,体积小,透亮,无突起。培养2-3 d,可见胞体增大,突起增多延长;培养6-7 d,细胞体大饱满,突起明显增加延长并交织成网,光晕明显,立体感强。培养20 d后,死亡细胞明显增加,细胞出现内空泡,突起粗细不均,甚至脱壁,发生细胞崩解。
方法简介 实验室分离的大鼠脊髓神经元细胞采用胶原酶-联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
质量检测 实验室分离的大鼠脊髓神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

自备试剂:0.25%、多聚-L-赖溶液(1×)或多聚-L-赖溶液(10×)、PBS、培养基
包被条件:PLL(0.1mg/mL)
培养基:大鼠脊髓神经元细胞培养基(含B-27Supplement、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:神经元细胞样
传代比例:不传代
传代特性:属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液:0.125%
大鼠脊髓神经元细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
原代细胞培养步骤:

取材与预处理:取新生24小时内Wistar大鼠,麻醉后无菌取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管。
消化:剪碎肺组织,依次用0.2%胶原酶(37℃震荡1h)和0.5%酶(消化30min)消化,终止后过滤。
纯化:采用IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后重悬接种。
培养:使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
培养方法:

原代细胞培养
材料:新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基(含10%胎牛血清)。
步骤:
取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管,剪碎。
依次用胶原酶(37℃震荡1h)和酶(消化30min)消化,终止后过滤。
通过IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后接种于培养皿。
37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
注意事项:消化时间需严格控制(胎鼠25分钟,新生鼠40-60分钟),避免过度消化导致细胞死亡。
细胞系培养
传代:0.25%消化1-2分钟,加入含血清培养基终止,按1:2-1:4比例传代。
条件:DMEM+10%胎牛血清,每周换液2-3次,37℃、5% CO₂培养。
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