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ARTICLES商品属性:

产品名称 | 大鼠前列腺成纤维细胞品牌 | 英文名称 | Rat Prostate Fibroblasts |
产品规格 | 5×10^5 | 货号 | YS-01X7539 |
产品信息:

产品名称 大鼠前列腺成纤维细胞
组织来源 前列腺
产品规格 5×10^5Cells/T25
细胞简介 大鼠前列腺成纤维细胞分离自前列腺组织;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成对的实质性器宫,由腺组织和肌组织构成。前列腺如栗子,底朝上,与膀胱相贴,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面贴耻骨联合,后面依直肠。前列腺腺体的中间有尿道穿过,扼守着尿道上口,所以,前列腺有问题时,排尿首先受影响。前列腺是机体非常少有的,具有内、外双重分泌功能的性分泌腺。作为外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是构成精液主要成分;作为内分泌腺,前列腺分泌的激素称为“前列腺素"。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的前列腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6 h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介 实验室分离的大鼠前列腺成纤维细胞采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
质量检测 实验室分离的大鼠前列腺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

自备试剂:0.25%、PBS、培养基
培养基:大鼠前列腺成纤维细胞培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代比例:1:2
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
原代细胞培养步骤:

取材与预处理:取新生24小时内Wistar大鼠,麻醉后无菌取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管。
消化:剪碎肺组织,依次用0.2%胶原酶(37℃震荡1h)和0.5%酶(消化30min)消化,终止后过滤。
纯化:采用IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后重悬接种。
培养:使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
培养方法:

原代细胞培养
材料:新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基(含10%胎牛血清)。
步骤:
取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管,剪碎。
依次用胶原酶(37℃震荡1h)和酶(消化30min)消化,终止后过滤。
通过IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后接种于培养皿。
37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
注意事项:消化时间需严格控制(胎鼠25分钟,新生鼠40-60分钟),避免过度消化导致细胞死亡。
细胞系培养
传代:0.25%消化1-2分钟,加入含血清培养基终止,按1:2-1:4比例传代。
条件:DMEM+10%胎牛血清,每周换液2-3次,37℃、5% CO₂培养。
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