大鼠外周血淋巴细胞培养体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

商品属性：

产品信息：

产品名称 大鼠外周血淋巴细胞

简称 PBL;PPL

组织来源 血液组织

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介 大鼠外周血淋巴细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生，主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中，是机体免疫应答功能的重要细胞成分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵"。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（又名T细胞）、B淋巴细胞（又名B细胞）和自然杀伤（NK）细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的最初来源是相同的，都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B细胞在骨髓中分化成熟。当受抗原刺激后，T淋巴细胞即转化为淋巴母细胞，再分化为致敏T淋巴细胞，参与细胞免疫，其免疫功能主要是抗胞内感染、瘤细胞与异体细胞等；而B淋巴细胞是先转化为浆母细胞，再分化为浆细胞，产生并分泌免疫球蛋白（抗体），参与体液免疫，其功能是产生抗体，提呈抗原，以及分泌细胞内因子参与免疫调节；NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应，具有杀伤靶细胞的作用。

方法简介 实验室分离的大鼠外周血淋巴细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测 实验室分离的大鼠外周血淋巴细胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

自备试剂： 0.25%  、PBS  、培养基

培养基： 大鼠外周血淋巴细胞 培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 悬浮

细胞形态： 圆形

传代比例： 不传代

传代特性： 不增殖；不传代

消化液：0.25%

原代细胞培养步骤：

取材与预处理‌：取新生24小时内Wistar大鼠，麻醉后无菌取出肺组织，PBS冲洗去除血管和气管‌。

‌消化‌：剪碎肺组织，依次用0.2%胶原酶（37℃震荡1h）和0.5%酶（消化30min）消化，终止后过滤‌。

‌纯化‌：采用IgG吸附法去除未贴壁细胞，离心后重悬接种‌。

‌培养‌：使用含10%胎牛血清的DMEM培养基，37℃、5% CO₂培养，24小时后换液‌。

培养方法‌：

原代细胞培养‌

‌材料‌：新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基（含10%胎牛血清）。

‌步骤‌：

取出肺组织，PBS冲洗去除血管和气管，剪碎。

依次用胶原酶（37℃震荡1h）和酶（消化30min）消化，终止后过滤。

通过IgG吸附法去除未贴壁细胞，离心后接种于培养皿。

37℃、5% CO₂培养，24小时后换液。

‌注意事项‌：消化时间需严格控制（胎鼠25分钟，新生鼠40-60分钟），避免过度消化导致细胞死亡。

‌细胞系培养‌

‌传代‌：0.25%消化1-2分钟，加入含血清培养基终止，按1:2-1:4比例传代。

‌条件‌：DMEM+10%胎牛血清，每周换液2-3次，37℃、5% CO₂培养。

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