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ARTICLES商品属性:

产品名称 | 人呼吸道上皮细胞规格 | 英文名称 | Human Respiratory Epithelial Cells |
产品规格 | 5×10^5 | 货号 | YS-01X7069 |
产品信息:

产品名称 人呼吸道上皮细胞
组织来源 呼吸道
产品规格 5×10^5Cells/T25
细胞简介 人呼吸道上皮细胞分离自呼吸道;呼吸道是肺呼吸时气流所经过的通道,有肺脊椎动物的呼吸道分上、下两部:鼻、咽和喉合称上呼吸道。气管及其以后一分再分的管道,合称为下呼吸道,或称为气管树。气管树是随着动物的进化逐渐复杂化的。整个呼吸道内表面都分布有分泌液和纤毛(鼻孔、咽后壁和声带黏膜除外),它能温暖(或冷却)、湿润和净化吸入的空气,对于呼吸器官和机体有着保护作用。呼吸道以骨或软骨做支架,其内表面覆盖着黏膜,黏膜内分布着丰富的毛细血管。呼吸道上皮细胞属于假复层纤毛柱状上皮,分布于呼吸道的内表面,主要由柱状,杯形,梭形和锥形等不同形状细胞组成。看上去像复层上皮,但实际上所有细胞底部均附于基膜上,属单层上皮,故称假复层柱状上皮,上皮表面有纤毛,杯状细胞可分泌粘液,包裹着大量细菌,借助纤毛不断摆动将其慢慢移动至出消化道。
方法简介 实验室分离的人呼吸道上皮细胞采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
质量检测 实验室分离的人呼吸道上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

自备试剂: 0.25% 、鼠尾胶原蛋白Ⅰ型(1×)或鼠尾胶原蛋白Ⅰ型(1 mg/mL) 、PBS 、培养基
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 人呼吸道上皮细胞培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液:0.25%
原代细胞培养步骤:

取材与预处理:取新生24小时内Wistar大鼠,麻醉后无菌取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管。
消化:剪碎肺组织,依次用0.2%胶原酶(37℃震荡1h)和0.5%酶(消化30min)消化,终止后过滤。
纯化:采用IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后重悬接种。
培养:使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
培养方法:

原代细胞培养
材料:新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基(含10%胎牛血清)。
步骤:
取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管,剪碎。
依次用胶原酶(37℃震荡1h)和酶(消化30min)消化,终止后过滤。
通过IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后接种于培养皿。
37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
注意事项:消化时间需严格控制(胎鼠25分钟,新生鼠40-60分钟),避免过度消化导致细胞死亡。
细胞系培养
传代:0.25%消化1-2分钟,加入含血清培养基终止,按1:2-1:4比例传代。
条件:DMEM+10%胎牛血清,每周换液2-3次,37℃、5% CO₂培养。
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