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产品名称 | 人淋巴结成纤维细胞图片 | 英文名称 | Human Lymph Node Fibroblasts |
产品规格 | 5×10^5 | 货号 | YS-01X8300 |
产品信息:

产品名称 人淋巴结成纤维细胞
组织来源 淋巴组织
产品规格 5×10^5Cells/T25
细胞简介 人淋巴结成纤维细胞分离自淋巴组织;淋巴结是呈椭圆形或蚕豆形的淋巴组织小体,大小不一,新鲜时呈灰红色。穿插于淋巴管的行程中,并与淋巴管相通连。淋巴结主要由淋巴组织和淋巴窦组成,外面包以致密结缔组织被膜,被膜向淋巴结内伸入,形成许多间隔或小梁,构成淋巴结的网状支架,并把淋巴结实质分隔成许多部分。这些结缔组织由成纤维细胞构成,对淋巴管起到保护和支持作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6 h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介 实验室分离的人淋巴结成纤维细胞采用混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
质量检测 实验室分离的人淋巴结成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

自备试剂: 0.25% 、PBS 、培养基
培养基: 人淋巴结成纤维细胞培养基(基础培养基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
原代细胞培养步骤:

取材与预处理:取新生24小时内Wistar大鼠,麻醉后无菌取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管。
消化:剪碎肺组织,依次用0.2%胶原酶(37℃震荡1h)和0.5%酶(消化30min)消化,终止后过滤。
纯化:采用IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后重悬接种。
培养:使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
培养方法:

原代细胞培养
材料:新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基(含10%胎牛血清)。
步骤:
取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管,剪碎。
依次用胶原酶(37℃震荡1h)和酶(消化30min)消化,终止后过滤。
通过IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后接种于培养皿。
37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
注意事项:消化时间需严格控制(胎鼠25分钟,新生鼠40-60分钟),避免过度消化导致细胞死亡。
细胞系培养
传代:0.25%消化1-2分钟,加入含血清培养基终止,按1:2-1:4比例传代。
条件:DMEM+10%胎牛血清,每周换液2-3次,37℃、5% CO₂培养。
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