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ARTICLES商品属性:

产品名称 | 人肾足突细胞品牌 | 英文名称 | Human Renal Podocyte Cells |
产品规格 | 5×10^5 | 货号 | YS-01X7272 |
产品信息:

产品名称 人肾足突细胞
组织来源 肾组织
产品规格 5×10^5Cells/T25
细胞简介 人肾足突细胞分离自肾组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。足细胞(podocyte)即肾小囊脏层上皮细胞,它附着于肾小球基底膜(GBM)的外侧,连同GBM和毛细血管内皮一起构成了肾小球血液滤过屏障。足细胞特殊的解剖位置,使得其体内研究较为困难;又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞,体外培养的原代细胞不能增殖。足细胞呈星型多突状,胞体较大,由胞体伸出许多突起,又称足突(FP),呈指状交叉复盖于GBM外表面,并通过黏附分子和蛋白多糖分子与GBM相连。足细胞在正常情况下可以分泌GBM的主要组成成分,IV型胶原和纤维连接蛋白(FN);在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解GBM作用的基质金属(MMPs)和组织,从而在GBM的代谢平衡中发挥重要作用。足细胞之间邻近的足突相互交替,形成了许多30-40 nm的裂孔,孔上覆盖一层厚4-6 nm的裂孔隔膜,即肾小球足突间裂孔隔膜。后者是血浆蛋白通过脉管系统的后屏障,对于维持肾小球滤过屏障结构与功能完整性发挥关键作用。
方法简介 实验室分离的人肾足突细胞采用机械研磨过不同孔径不锈钢网筛结合胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
质量检测 实验室分离的人肾足突细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

自备试剂: 0.25% 、鼠尾胶原蛋白Ⅰ型(1×)或鼠尾胶原蛋白Ⅰ型(1 mg/mL) 、PBS 、培养基
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 人肾足突细胞培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 上皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液:0.25%
原代细胞培养步骤:

取材与预处理:取新生24小时内Wistar大鼠,麻醉后无菌取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管。
消化:剪碎肺组织,依次用0.2%胶原酶(37℃震荡1h)和0.5%酶(消化30min)消化,终止后过滤。
纯化:采用IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后重悬接种。
培养:使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
培养方法:

原代细胞培养
材料:新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基(含10%胎牛血清)。
步骤:
取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管,剪碎。
依次用胶原酶(37℃震荡1h)和酶(消化30min)消化,终止后过滤。
通过IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后接种于培养皿。
37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
注意事项:消化时间需严格控制(胎鼠25分钟,新生鼠40-60分钟),避免过度消化导致细胞死亡。
细胞系培养
传代:0.25%消化1-2分钟,加入含血清培养基终止,按1:2-1:4比例传代。
条件:DMEM+10%胎牛血清,每周换液2-3次,37℃、5% CO₂培养。
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