人外周血T淋巴细胞图片体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

商品属性：

产品信息：

产品名称 人外周血T淋巴细胞

组织来源 外周血

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介 人外周血T淋巴细胞分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞（PBMC）即外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞和单核细胞。目前，主要的分离方法是密度梯度离心法，因为血液中各有形成分的比重存在差异，因此得以分离出不同的细胞。T淋巴细胞（T-lymphocyte）来源于骨髓的多能干细胞（胚胎期则来源于卵黄囊和肝）。在人体胚胎期和初生期，骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内，在胸腺激素的诱导下分化成熟，成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细胞经血流分布至外周免疫器官的胸腺依赖区定居，并可经淋巴管、外周血和组织液等进行再循环，发挥细胞免疫及免疫调节等功能。T细胞的再循环有利于广泛接触进入体内的抗原物质，加强免疫应答，较长期保持免疫记忆。T细胞的细胞膜上有许多不同的标志，主要是表面抗原和表面受体。这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子。多能干细胞转变为淋巴样前体细胞（Lymphoid precursor）迁移至胸腺，在的诱导下，经历一系列有序的分化过程，逐渐在胸腺发育成熟为识别各种抗原的T细胞库。T淋巴细胞进入胸腺后首先经历两个阶段：①早期T淋巴细胞发育阶段，即始祖CIM和CD8双阴性T淋巴细胞（double negative cell, DN）分化为CD4和CD8双阳性T细胞（double positive cell, DP）；②DP细胞分别经历阳性选择阶段和阴性选择阶段获取MHC限制性识别能力和对自身抗原的耐受性，发育为其表面标志为CD4或CD8的单阳性T细胞（single positive cell，SP），迁往周围淋巴器官定居。T细胞是相当复杂的不均一体、又不断在体内更新、在同一时间可以存在不同发育阶段或功能的亚群，但分类原则和命名比较混乱，尚未统一。按免疫应答中的功能不同，可将T细胞分成若干亚群，一致的有：1、辅助性T细胞（Helper T cells, Th），具有协助体液免疫和细胞免疫的功能；2、抑制性T细胞（Suppressor T cells, Ts），具有抑制细胞免疫及体液免疫的功能；3、效应T细胞（Effector T cells, Te），具有释放淋巴因子的功能；4、细胞毒性T细胞（Cytotoxic T cells, Tc），具有杀伤靶细胞的功能；5、迟发性反应T细胞（Delayed type hypersensitivity T cells, Td），有参与Ⅳ型反应的作用；放大T细胞（Ta），可作用于Th和Ts，有扩大免疫效果的作用；6、原始的或天然T细胞（Virgin or Natural T cells），他们和抗原接触后分化成效应T细胞和记忆T细胞；7、记忆T细胞（Memory T cell, Tm），有记忆特异性抗原刺激的作用。T细胞在体内存活的时间可数月至数年。其记忆细胞存活的时间则更长。其中，Th细胞又被称为CD4+细胞，因为其在表面表达CD4（cluster of differentiation 4）。通过与MHCⅡ（主要组织相容性复合体，major histocompatibility complex）递呈的多肽抗原反应被激活。MHCⅡ在抗原递呈细胞（antigen presenting cells,APCs）表面表达。一旦激活，可以分泌细胞因子，调节或者协助免疫反应。Tc细胞又名为CD8+细胞，其表面表达CD8。这类细胞可以通过MHCI与抗原直接结合。淋巴细胞主要包括T淋巴细胞（CD3+），B淋巴细胞（CD19+），NK细胞（CD16+CD56+）。

方法简介 实验室分离的人外周血T淋巴细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法结合磁珠分选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测 实验室分离的人外周血T淋巴细胞经CD3免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基： 人外周血T淋巴细胞培养基(基础培养基，含IL-2、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 悬浮

细胞形态： 圆形

传代比例： 不传代

传代特性： 不建议传代

人外周血T淋巴细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

原代细胞培养步骤：

取材与预处理‌：取新生24小时内Wistar大鼠，麻醉后无菌取出肺组织，PBS冲洗去除血管和气管‌。

‌消化‌：剪碎肺组织，依次用0.2%胶原酶（37℃震荡1h）和0.5%酶（消化30min）消化，终止后过滤‌。

‌纯化‌：采用IgG吸附法去除未贴壁细胞，离心后重悬接种‌。

‌培养‌：使用含10%胎牛血清的DMEM培养基，37℃、5% CO₂培养，24小时后换液‌。

培养方法‌：

原代细胞培养‌

‌材料‌：新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基（含10%胎牛血清）。

‌步骤‌：

取出肺组织，PBS冲洗去除血管和气管，剪碎。

依次用胶原酶（37℃震荡1h）和酶（消化30min）消化，终止后过滤。

通过IgG吸附法去除未贴壁细胞，离心后接种于培养皿。

37℃、5% CO₂培养，24小时后换液。

‌注意事项‌：消化时间需严格控制（胎鼠25分钟，新生鼠40-60分钟），避免过度消化导致细胞死亡。

‌细胞系培养‌

‌传代‌：0.25%消化1-2分钟，加入含血清培养基终止，按1:2-1:4比例传代。

‌条件‌：DMEM+10%胎牛血清，每周换液2-3次，37℃、5% CO₂培养。

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