兔肝动脉平滑肌细胞培养体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

商品属性：

产品信息：

产品名称 兔肝动脉平滑肌细胞

组织来源 肝动脉组织

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介 兔肝动脉平滑肌细胞分离自肝动脉组织；在胚胎期，肝脏有3条动脉供血，分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉，这3条动脉分别肝脏的不同部位。出生后，一般保留一条动脉，大部分为起源于腹腔动脉的动脉，由其分出左、右肝动脉供应左、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况，如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉（25%），起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉（10%），而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外，还有5%像胚胎期一样，3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉，如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时，此种异位起源的肝动脉称替代动脉，如果在常见肝动脉类型外，还有一支这种异位起始的动脉肝脏的一部分血流，这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉平滑肌细胞是肝动脉的重要结构细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肝动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。血管平滑肌细胞的加速生长潜能是血管疾病进展的关键因素，新研究表明血管平滑肌细胞表达的ICAM-1和VCAM-1能促进血管壁的炎症反应，并且与血管疾病的发展及稳定性有关。

方法简介 实验室分离的兔肝动脉平滑肌细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测 实验室分离的兔肝动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

自备试剂：0.25%  、PBS、培养基

培养基： 兔肝动脉平滑肌细胞 培养基(基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液： 0.25%

原代细胞培养步骤：

取材与预处理‌：取新生24小时内Wistar大鼠，麻醉后无菌取出肺组织，PBS冲洗去除血管和气管‌。

‌消化‌：剪碎肺组织，依次用0.2%胶原酶（37℃震荡1h）和0.5%酶（消化30min）消化，终止后过滤‌。

‌纯化‌：采用IgG吸附法去除未贴壁细胞，离心后重悬接种‌。

‌培养‌：使用含10%胎牛血清的DMEM培养基，37℃、5% CO₂培养，24小时后换液‌。

培养方法‌：

原代细胞培养‌

‌材料‌：新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基（含10%胎牛血清）。

‌步骤‌：

取出肺组织，PBS冲洗去除血管和气管，剪碎。

依次用胶原酶（37℃震荡1h）和酶（消化30min）消化，终止后过滤。

通过IgG吸附法去除未贴壁细胞，离心后接种于培养皿。

37℃、5% CO₂培养，24小时后换液。

‌注意事项‌：消化时间需严格控制（胎鼠25分钟，新生鼠40-60分钟），避免过度消化导致细胞死亡。

‌细胞系培养‌

‌传代‌：0.25%消化1-2分钟，加入含血清培养基终止，按1:2-1:4比例传代。

‌条件‌：DMEM+10%胎牛血清，每周换液2-3次，37℃、5% CO₂培养。

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