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产品名称 | 小鼠骨髓来源内皮祖细胞培养 | 英文名称 | Mouse Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells |
产品规格 | 5×10^5 | 货号 | YS-01X7439 |
产品信息:

产品名称 小鼠骨髓来源内皮祖细胞
简称 BM-EPCs;BMEPCs
组织来源 骨髓
产品规格 5×10^5Cells/T25
细胞简介 小鼠骨髓来源内皮祖细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞,亦称为成血管细胞(Angioblast),是群具有游走特性,能进步增殖分化的幼稚内皮细胞,缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,不能形成管腔样结构,其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示,内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用,并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路,EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这领域新的热点。
方法简介 实验室分离的小鼠骨髓来源内皮祖细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
质量检测 实验室分离的小鼠骨髓来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

自备试剂: 0.25% 、多聚-L-赖溶液(1×)或多聚-L-赖溶液(10×)或明胶包被液(1 mg/mL) 、PBS 、培养基
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 小鼠骨髓来源内皮祖细胞 培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代;不建议多次传代
消化液: 0.25%
原代细胞培养步骤:

取材与预处理:取新生24小时内Wistar大鼠,麻醉后无菌取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管。
消化:剪碎肺组织,依次用0.2%胶原酶(37℃震荡1h)和0.5%酶(消化30min)消化,终止后过滤。
纯化:采用IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后重悬接种。
培养:使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
培养方法:

原代细胞培养
材料:新生大鼠肺组织、0.2%胶原酶、0.5%酶、DMEM培养基(含10%胎牛血清)。
步骤:
取出肺组织,PBS冲洗去除血管和气管,剪碎。
依次用胶原酶(37℃震荡1h)和酶(消化30min)消化,终止后过滤。
通过IgG吸附法去除未贴壁细胞,离心后接种于培养皿。
37℃、5% CO₂培养,24小时后换液。
注意事项:消化时间需严格控制(胎鼠25分钟,新生鼠40-60分钟),避免过度消化导致细胞死亡。
细胞系培养
传代:0.25%消化1-2分钟,加入含血清培养基终止,按1:2-1:4比例传代。
条件:DMEM+10%胎牛血清,每周换液2-3次,37℃、5% CO₂培养。
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