小鼠视乳头星形胶质细胞培养体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介：

产品名称 小鼠视乳头星形胶质细胞

组织来源 眼球

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞简介 小鼠视乳头星形胶质细胞分离自视神经乳头；视乳头位于黄斑区鼻侧附近，境界清楚，呈白色、圆盘状，因此也称为视盘。视网膜上视觉纤在此汇集，并于此穿出眼球向视中枢传递。视乳头有小凹陷区，称为视杯或生理凹陷。视乳头是视神经纤聚合组成视神经的起始端，它没有视细胞，因而没有视觉，在视野中是生理盲点。视乳头是开角型青光眼早受损的部位，星形胶质细胞是视神经乳头处主要的胶质细胞类型，可为视网膜神经节细胞无髓鞘的轴突提供结构和生物支持。青光眼视变是全球不可逆性致肓眼病。青光眼视变以视网膜神经节细胞轴突丧失并伴有视乳头处细胞外基质重坦为主要特征。导致视网膜神经节细胞丧失的病理生理机制尚未阐明，神经胶质细胞对调控神经元微环境起多重作用，越来越多的证据表明胶质细胞町能对神经系统发育、损伤、修复及再生起极为关键的作用。视乳头星形胶质细胞胞体多扁平，体积较大，形状多呈不规则的多边形，突起较粗，胞核为椭圆形，核仁清晰可见，核周有较密集物质，胞质稀疏，骨架结构良好，明显不同于长梭形的成纤细胞形态。

方法简介 实验室分离的小鼠视乳头星形胶质细胞采用-胶原酶联合消化法、结合差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

质量检测 实验室分离的小鼠视乳头星形胶质细胞经GFAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品信息：

培养信息：

自备试剂： 0.25% 、PBS 、培养基

培养基： 小鼠视乳头星形胶质细胞 培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 1:2

传代特性： 可传3代左右

消化液： 0.25%

冻存步骤：

冻存前准备‌

确保细胞处于对数生长期，密度达80%-90%‌。

配制冻存液：推荐50%基础培养基+40%FBS+10%DMSO‌。

‌细胞处理‌

弃去培养上清，用PBS润洗1-2次‌。

加入消化后，用含血清的培养基终止消化。

‌冻存操作‌

离心（1000RPM，3-4分钟）后弃上清，用冻存液重悬细胞‌。

分装至冻存管（每管1mL，细胞数100-400万）‌。

4℃静置10分钟，-20℃ 2小时，-80℃过夜后转入液氮‌。

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操作实验步骤：

1. 原代细胞分离

‌组织获取‌：采用成年SD大鼠，快速取出海马或脊髓组织，置于低温人工脑脊液（0-4℃）中保存‌。

‌消化与离心‌：使用木瓜蛋白酶消化组织，通过Optiprep不连续梯度离心，收集组织细胞密集带‌。

‌细胞培养‌：将细胞悬液接种于含B27添加剂和碱性成纤维细胞生长因子2（FGF-2）的培养基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培养‌。

2. 细胞纯化

‌差速贴壁法‌：通过摇床分离（200r/min去除小胶质细胞，280r/min收集少突前体细胞）‌。

‌免疫磁珠分选‌：利用NG2抗体标记后通过磁珠分选，提高纯度‌。

3. 细胞传代与冻存

‌传代‌：使用含EDTA和DNase I的消化液处理细胞，按1:3比例传代‌。

‌冻存‌：将细胞重悬于冻存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降温后保存于液氮中‌。

4. 功能验证

‌免疫荧光染色‌：检测NG2、GFAP等标志物表达，确认细胞纯度‌。

‌电生理记录‌：通过膜片钳技术检测细胞电特性（如钠电流）。