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如何判断原代细胞污染了?

更新时间:2018-04-10点击次数:4130

状态 1:原代细胞培养液变浑浊了,经常见到是米汤样,黄色液体,一般认为细菌污染。
状态 2:细胞培养基内含有能动的小黑点,一般认为是黑胶虫。
状态 3:胞培养基清亮,但是能看到飘在培养液带有毛毛的白色的菌状物质,有可能就是真菌感染。
策略:细胞污染了就直接扔了,还得把培养箱用酒精棉球擦干净,并用紫外照射半小时,防止再次污染。同时建议细胞培养时,在培养基中加入青链霉素 (尤其是初学者)
细胞培养过程中,细胞周围包括细胞上有很多小黑点,怎么办?
策略 1:用胰酶消化下来后,低速短时间离心,不同实验室不一样,如果平时是 1 000 转 5 min 的话,就可以改为 700 转 3 min,用新的培养瓶培养细胞,细胞收集是少一点,但是一般都能干净很多。多传几代就好多了。
策略 2:如果多次尝试之后还是不干净,就怀疑是否存在支原体污染了,用抗支原体药就 OK 了。一般用上 3~5 天,细胞就干干净净了。
细胞培养过程中,发现贴壁细胞表面沾了很多死细胞,传代过程中一直存在怎么破?
有一招屡试不爽,那就是用 PBS 洗两遍之后,加胰酶进去,晃一晃,迅速将胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死细胞由于粘附能力很弱,*次加胰酶进去以后会掉下来,第二次加胰酶下来的细胞才是活性比较强的原代细胞。整完一次之后,再次传代方法同上,一般 2~3 次之后,细胞就完好如初了。
效价测定    FSH190IU、LH242IU/支    150524-200503    人绝经尿促性素(HMG)
效价测定    21IU/支    050529-200902    缩宫素(合成)
免疫测定用    600μIU    150530-0312    促甲状腺素(TSH)
免疫测定用    930mIU    150531-201003    促黄体生成激素(LH)
免疫测定用    9mIU/支    150532-0004    泌乳素
免疫测定用    450mIU/支    150533-0212    促卵泡生成素
免疫测定用    1.22mIU/0.61ug/支    534-9604    生长激素
免疫测定用    240ng/0.5ml/支    150535-201002    人绒毛膜促性腺激素β亚单位
原代细胞

 

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