肿瘤细胞如何进行传代？

肿瘤细胞是科研实验中常用到的细胞，当人脐静脉内皮细胞达到90%融合时，需要对细胞进行传代培养。

首先培养瓶的准备：用纤维粘连蛋白（BPF，货号#8248）包被培养瓶，包被浓度为2ug/cm2，包被时间为4度过夜或37度一小时。

将培养基（ECM，货号#1001）、胰酶/EDTA消化液（T/S，货号#0103）、胰酶中和液（TNS，货号#0113）和无钙镁离子的磷酸盐缓冲液（DPBS，货号#0303），温度回复至室温，我们不推荐用37°C水浴加热试剂和培养基。

弃去原培养瓶中培养基，用10mlDPBS冲洗人脐静脉内皮细胞，然后加入2ml胰酶消化液。轻轻摇晃培养瓶以至胰酶消化液覆盖所有人脐静脉内皮细胞。注意：使用ScienCell实验室的胰酶/EDTA消化液，会把胰酶消化对脐静脉内皮细胞的损害减少到zui低。

将培养瓶放入37度培养箱中1-2分钟，在孵化后期，轻轻拍打培养瓶以使脐静脉内皮细胞脱离瓶壁。显微镜下观察脐静脉内皮细胞形态变化，直至80%脐静脉内皮细胞变圆。然后立即加入10ml胰酶中和液并轻轻摇动培养瓶。

收集人脐静脉内皮细胞并将其转入50ml离心管中。再加入10ml培养基冲洗培养瓶以确保收集所有的残余脐静脉内皮细胞。在显微镜下观察培养瓶中剩余脐静脉内皮细胞的数量以确定是否将脐静脉内皮细胞大部分收集，剩余脐静脉内皮细胞数应小于5%。

以1000转/分（1000rpm)离心收取的脐静脉内皮细胞5分钟，弃去上清，在新加的培养基中重悬脐静脉内皮细胞。

对肿瘤细胞计数，然后将它们接种到新的纤维粘连蛋白包被过的培养瓶中，37度培养即可。

 CBP/CREBBP 血小板源性生长因子受体-B抗体

 Cbx8 血小板源性生长因子受体-A抗体

 CC16 血小板源性生长因子-B抗体

 CCK8 血小板源性生长因子-BB抗体

 CCL1/TCA3/I-309 血小板源性生长因子-A抗体

 CCL11/Eotaxin 1 血小板因子4抗体

 CCL12/MCP5 血小板糖蛋白GPIb抗体

 CCL13/MCP-4 血小板内皮细胞黏附分子-1抗体

 CCL14/HCC-1 血小板内皮细胞黏附分子-1抗体

 CCL15/MIP5 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗体
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