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鸡甲状旁腺激素(PTH)elisa酶联免疫试剂盒操作步骤

更新时间:2023-06-20点击次数:156

鸡甲状旁腺激素(PTH)elisa酶联免疫试剂盒操作步骤:


1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

AKR1B10英文名称:醛糖还原酶相关蛋白质抗体

AKR1C2英文名称:胆汁酸结合蛋白DDH2抗体

ANGPTL3英文名称:血管生成素样蛋白3抗体

Acylglycerol Kinase英文名称:甘油酯激酶线粒体抗体

phospho-alpha Adducin(Ser726)英文名称:磷酸化内收蛋白a1抗体

ATG16L2英文名称:自噬体ATG16L2蛋白抗体

ACPT英文名称:酸性磷酸酶抗体

Acid Phosphatase英文名称:酸性磷酸酶抗体

AKIP英文名称:极光激酶A相互作用蛋白1抗体

APOL6英文名称:载脂蛋白样蛋白6抗体

ARTS英文名称:凋亡相关蛋白TGFb信号抗体

A2LD1英文名称:A2LD1蛋白抗体

A4GNT英文名称:α1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶α4Gn-T抗体

AADAC英文名称:芳香乙酰胺脱乙酰基酶抗体

AADACL4英文名称:芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白4抗体

AASDHPPT英文名称:氨基乙二酸半醛脱氢酶磷酸泛酰巯基乙胺转移酶抗体

AASS英文名称:赖氨酸酮戊二酸还原酶抗体

ANKRD6英文名称:锚蛋白重复域6抗体

Arginase II英文名称:精氨酸酶2抗体

AKR1C3英文名称:醛固酮还原酶家族1成员C3抗体

ACTHR英文名称:促肾上腺皮质激素受体

AGRP英文名称:褐黑素相关蛋白ART抗体

Adrenodoxin英文名称:肾上腺皮质线粒体铁氧还蛋白抗体

Adracalin英文名称:Allgrove综合征相关蛋白抗体

AAV5 capsid protein VP1英文名称:腺相关病毒5 VP1抗体


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