如何来选择原代细胞仪测定的常用荧光染料呢？

1. 原代细胞抗原的密度
① 高表达的抗原可选择几乎所有的荧光素；
② 低密度表达的抗原需要可提供较高S/N比值的荧光素如PE/APC。

2. 自发荧光
① 每种细胞群都有不同水平的自发荧光；
② 所有的荧光通道均可观察到自发荧光，但自发荧光强度在波长较长时迅速降低；
③ 对自发荧光较强的细胞，选择发射波长较长的荧光素（如APC）可得到较好的S/N比值；
④ 对自发荧光比较弱的细胞，发射波长较长的荧光素对S/N提高没有明显的改善。可选用FITC。

3. 非特异结合
① 许多荧光抗体可产生低水平的非特异结合，使阴性细胞群的荧光超出自发荧光；
② 非特异结合由下列因素引起：
单克隆抗体的同型抗体：一些IgG同型抗体可能与一些细胞上的Fc受体结合；
所用的荧光素：羰花青染料（如CY3、CY5、CY5.5、CY7）和Tex-Red直标的抗体及一些复合染料标记的抗体在标记某些亚群的细胞时有时会提高结合率；对CY5来说，是因为该染料与低亲和力Fc受体的极低亲和力相互作用。这也是复合染料PE-CY5的特性。

4. 复合染料：小心信号衰退
① 复合染料因为光、固定剂或温度升高会致信号衰退，是复合染料在上一级染料处发光。该种现象从一小部分亚群开始，导致APC或PE染色细胞群假阳性；
② 减少样本暴露于光、高温或固定剂，可很大程度上避免这一问题；
③ 选择染料时需要考虑：复合染料的信号衰退会不会降低APC或PE的灵敏度。如果是，就要选择另外的试剂搭配；
④ 原代细胞如果样本需要固定，要选择稳定的固定剂，可有效阻止复合染料的信号衰退。
L-4-Hydroxyisoleucine    HPLC≥98%    L-4-羟基异亮氨酸
        
Secoisolariciresinol Diglucoside    HPLC≥98%    亚麻木酚素(SDG)
α-mangostin    HPLC≥98%    α-倒捻子素
β-mangostin    HPLC≥98%    β-倒捻子素
3-isomangostin    HPLC≥98%    3-异倒捻子素
Cichoric Acid    HPLC≥98%    菊苣酸
    HPLC≥98%    梭砂贝母碱
Momordin Ic    HPLC≥98%    地肤子皂苷Ic
Pectolinarin    HPLC≥98%    大蓟苷（柳穿鱼叶苷）
2"-O-galloylhyperin    HPLC≥98%    2”-O-没食子酰基金丝桃苷
9-methoxycamptothecine    HPLC≥98%    9-甲氧基喜树碱
原代细胞