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如何降低肿瘤细胞分离中的污染

更新时间:2017-09-29点击次数:220

在分离单核肿瘤细胞时,我们就必须采取措施来降低血小板污染。

在制备单核细胞悬液时,Stemcell给出了如下的建议:

1. 从Ficoll密度梯度离心中取出单核细胞层时,避免吸到富含血小板的血浆。

2. 缓慢离心,洗涤单核细胞(120×g,10分钟,常温)。

3. 小心弃上清,其中含有血小板,用新鲜的缓冲液重悬细胞(记得换个干净的吸头)。

4. 重复上面2步,总共洗涤3次。

另外,Stemcell还给出了一些降低血小板污染的其他建议:

• 使用大口径的针来抽取血液样本

• 轻轻地抽血,如果使用注射器推杆,不要大力牵引

• 抽血时使用更多的抗凝血剂,比如,增加肝素、EDTA或ACD的量

• 使用不含钙镁的缓冲液进行洗涤和细胞分离

• 在细胞分离缓冲液中使用更高水平的EDTA(2或3 mM)

• 确保轻柔操作,不要震荡

Stemcell公司的产品包括:检测造血干细胞功能的半固体培养基MethoCult®和 MyeloCult®系列,培养和鉴定间充质干细胞的MesenCult®系列,培养和分析神经干细胞的NeuroCult®系列,培养胚胎干细胞和多能干细胞的Es-Cult®系列产品,可以分选各种肿瘤细胞的免疫磁性分选系统EasySep®,全自动细胞分选仪RoboSep®,全自动克隆挑选系统 EasyPick®,及与其配套使用的ClonaCell®-HY试剂等等。

血小板是三大血细胞之一,在培养过程中由于黏性很大,还有容易污染,在培养中是一类不好对付的细胞。Stemcell认为,在制备血小板细胞悬液时,要使用大口径的针抽取样品,动作轻柔。
进口、国产    英文名称:    L-羟脯氨酸    L-Hydroxyproline    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    L-α-氨基-β-羟基丁酸    L-Threonine    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    D-α-氨基-β-羟基丁酸    D-Theronine    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    DL-α-氨基-β-羟基丁酸    DL-Theronine    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    N-叔丁氧羰基-L-苏氨酸    BOC-L-Threonine    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    N-苄氧羰基-L-苏氨酸    CBZ-L-Threonine    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    L-胰化蛋白氨基酸    L-Tryptophan    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    D-胰化蛋白氨基酸    D-Trytophan    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    DL-胰化蛋白氨基酸    DL-Trytophan    含量:    BR,99%
进口、国产    英文名称:    N-叔丁氧羰基-L-色氨酸    BOC-L-Tryptophan    含量:    BR,99%
肿瘤细胞

 

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