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生化法检测试剂盒:分光光度法、微量法、比色法、酶标法、高液相色谱法,自主,技术团队,操作简便快捷,规格合理、系列成套,价格合理,公司产品仅用于科研是广大科研工作者的好选择,详细产品咨询:
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
线粒体活性氧产生速率(ROS)测试盒价格 | 100管/96样 | 荧光法 | YS-01S6368 |
测定意义
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多,就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸,使机体出现氧化应激,同时,活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤,导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。
因此,通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。
测定原理:
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFH,DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品:
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
优点如下:
1、快速简便:操作时间短,48-50T,可测40例样本左右,96-100T,可测80例样本左右;
2、取样量微:常规操作取样量50l, 酶标仪操作仅需5l即可检测,部分试剂盒取样多少请;
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效;
4、再现性好:20倍稀释线性仍然良好;
5、回收试验: X =99%;
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强;
7、测试面广:可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等,部分试剂盒适用于检测植物。
操作注意事项:
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议 500万细菌或细胞加入 1mL提取液) ,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声 3s,间隔10s,重复30 次)8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
Anti-PAFR/FITC 荧光素标记抗血小板活化因子受体抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit IgG/Biotin 生物素化兔IgGMulti-class antibodies规格: 1ml
周期素D2抗体 Anti-Cyclin D2 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠k链 0.1ml
FXYD1 英文名称: 磷酸神经膜抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-VAV1(Tyr160) 磷酸化鸟苷酸转换因子VAV1抗体 规格 0.1ml
Rabbit IgG/Biotin 生物素化兔IgGMulti-class antibodies规格: 1ml
Inhibin Alpha 抑制素α抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽脑脊髓炎病毒AEV抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser149) 磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格 0.1ml
溴化已锭染色液 -红色 1ml Sigma原料,自产
Wnt1 英文名称: 信号通路Wnt1抗体 0.1ml
Dynorphin A 英文名称: 脑啡肽A抗体 0.2ml
Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽脑脊髓炎病毒AEV抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
SPARC 英文名称: 富含半胱酸的酸性分泌蛋白抗体 0.1ml
ENPP7 英文名称: 碱性鞘磷脂酶7抗体 0.1ml
抗B细胞粘附分子CD22抗体 Anti-CD22/fpc1/blcam 0.1ml
Anti-CD14/Biotin 生物素化CD14抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗体 GSK3α(Phospho-Ser21) 规格 0.1ml
CD5 CD5 多肽抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
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