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ARTICLES细胞特性:
1)】组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定:细胞免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
产品名称:小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
货号:YS-02X9915
细胞生长实验 :细胞生长良好,形态正常
储存条件:2℃-8℃,避光储存
运输条件:冰袋冷藏运输
公司产品仅用于科研
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备RPMI-1640 培养基;优质胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
注意事项:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻",传统的方法,LLC细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步骤:
一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用人子宫成纤维细胞*培养基纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
VEGFR2(VEGF-R2)Flk1/FITC 荧光素标记血管内皮生长因子受体2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依赖性激酶6抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
膜辅蛋白/内源性辅助因子活性蛋白抗体 CD46/MCP/membrane cofactor protein 0.1ml
SHC 英文名称: SH2结构域转化蛋白1抗体 0.2ml
phospho-eIF4EBP1 (Thr37 + Thr46) 英文名称: 磷酸化4E结合蛋白1抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-GluR1(Ser836) 磷酸化谷受体1抗体 规格 0.1ml
CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依赖性激酶6抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
VDAC peptide 电压依赖性阴离子通道抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PCMT1 天门冬甲基转移酶PCMT抗体 规格 0.2ml
IL12B Kit Human 人 IL12B / NKSF2 / p40 ELISA配对抗体 ELISA
TBRG4 英文名称: 转化生长因子β调节蛋白4抗体 0.2ml
C21orf54 英文名称: 21号染色体开放阅读框54抗体 0.2ml
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗体(N端)Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rabbit Goat IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗羊IgM 0.1ml
FMDV Polyprotein (3A protein) 英文名称: 口蹄疫病毒A型抗体 0.2ml
雌受体α/β抗体 ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 0.1ml
Peptide YY/PYY/FITC 荧光素标记酪酪肽抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser235) 磷酸化微管相关蛋白抗体 规格 0.1ml
Goat human IgM/Gold 金标记羊抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies规格: 0.5ml
小鼠骨髓瘤细胞;P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 体外微管蛋白聚合作用(polymerization)荧光检测试剂盒20次人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒,
体内微管蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒5次人甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒,
细胞骨架(肌动蛋白微丝;F-ACTIN)绿色荧光染色试剂盒10次人胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒,
细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂盒10次人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒,
微管(microtubules)荧光染色试剂盒10次小鼠糖原合成酶酶(GSK)ELISA试剂盒,
粘着斑蛋白(vinculin)荧光染色试剂盒10次小鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒,
驱动蛋白(kinesin)型ATP酶活性酶连续反应光谱法定量检测试剂盒20次小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒,
3,4-二氢嘧啶酮衍生物Monastrol(K-ATPase 抑制剂)小鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒,
细胞αSMA蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次小鼠热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒,
载玻片细胞αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒,
冻切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒,
石蜡切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒,
载玻片细胞αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒,
冻切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISA试剂盒,
石蜡切片组织αSMA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次猪生长素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒,
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